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19900628

铜虫 (正式写手)

[交流] ELPs的基因合成

1.有没有人做过ELPs的基因表达啊，感觉表达量超低，一般用什么纯化呢？组氨酸尾巴过柱子么？我的一纯化就没了，感觉要做出一定量来很烦呢。。。
2.关于酶切的问题，为什么我双酶切切出来四或者五条带呢？确定酶切位点是唯一的。。。
求高人指点啊~~
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1楼 2013-09-16 10:14:11
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19900628

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by xl0071334 at 2013-09-18 07:06:32
你的基因重复是是什么，我做的表达量很高的，纯化用温度变化和氯化钠。看来你没有看文献

我的是KV2F，我也不知道啊，你的表达量很高是多少？我也就是用温度和氯化钠纯化的，然后就没有了，纯化有没有什么需要注意的？氯化钠你是先配好溶液再加的还是直接加的氯化钠固体？而且我现在做的这个重复序列比较低，就四个重复的，表达出来的蛋白液比较小，蛋白胶跑的都很奇怪，还在连接重复更多的，总是连不上去。
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7楼2013-09-18 11:04:16
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xl0071334

至尊木虫 (著名写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
19900628: 金币+1, 高人请多指教~~ 2013-09-18 11:05:38
你的基因重复是是什么，我做的表达量很高的，纯化用温度变化和氯化钠。看来你没有看文献

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4楼2013-09-18 07:06:32
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xl0071334

至尊木虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
19900628: 金币+5 2013-09-20 21:11:24
给你一篇文献，可以按照里面的方法或者修改一下方法做吧，希望能帮助你解决问题。http://1000eb.com/piz7
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8楼2013-09-19 08:29:10
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19900628

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by xl0071334 at 2013-09-19 08:29:10
给你一篇文献，可以按照里面的方法或者修改一下方法做吧，希望能帮助你解决问题。http://1000eb.com/piz7

好的，谢谢了啊~~我再尝试一下，而且本人也是刚接触的分子生物学，多以有很多不太懂的地方。之后有问题，再过来请教大神~~
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9楼2013-09-20 21:10:10
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