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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药理学 » 凋亡蛋白相关蛋白Bax与Bcl2的western检测，高手做过的请讲解一下！！！！！
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czcpudai

铜虫 (正式写手)

[求助] 凋亡蛋白相关蛋白Bax与Bcl2的western检测，高手做过的请讲解一下！！！！！ 已有1人参与

本人最近要做两个与凋亡相关的蛋白Bax与Bcl2，主要的做法是用RIPA裂解液裂解细胞，取上清做western。请教一下，做过相关实验的高手，这两种蛋白是不是容易检测？？？ 检测的经验能够谈一下吗？？？？谢谢了！！
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1楼 2013-09-14 21:31:17
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czcpudai

铜虫 (正式写手)
大家进来讨论一下啊！！！
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2楼2013-09-16 00:08:47
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a83875785

铁杆木虫 (著名写手)
很容易检测，是常见的。
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3楼2013-09-16 10:44:58
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czcpudai

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by a83875785 at 2013-09-16 10:44:58
很容易检测，是常见的。

谢谢你啊，我想问一下你以前检测过这两种蛋白吗？使用的具体条件是什么样？？？比如转膜的条件？
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4楼2013-09-16 10:54:09
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a83875785

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by czcpudai at 2013-09-16 11:54:09
谢谢你啊，我想问一下你以前检测过这两种蛋白吗？使用的具体条件是什么样？？？比如转膜的条件？...

时间太长，忘记了，我是湿转，转膜是1h～1h30min之间吧，看看蛋白大小就知道了 一般在这范围内 都能转过去
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5楼2013-09-16 11:28:33
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czcpudai

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by a83875785 at 2013-09-16 11:28:33
时间太长，忘记了，我是湿转，转膜是1h～1h30min之间吧，看看蛋白大小就知道了 一般在这范围内 都能转过去...

非常感谢啊！
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6楼2013-09-16 11:54:24
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ahumcg

新虫 (初入文坛)
请问检测时凋亡时期有讲究吗？比如晚期能检测到吗，另外上样量是要多大，如果是一个六孔板的细胞能够吗
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7楼2013-10-17 22:20:28
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药理小虫子

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
辣笔v小新: 金币+1, 鼓励应助交流 2014-07-21 08:13:17
我最近正在做，还是比较好做出来的~我是湿法转的，55Min，100V。我用的六孔板，3000的蛋白浓度，上样15ul吧
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8楼2014-07-21 07:50:12
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