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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 如何在细胞水平上证明致肿瘤性？
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feilinshiji

银虫 (小有名气)

[求助] 如何在细胞水平上证明致肿瘤性？

采用real-time PCR能否检测出细胞癌基因的表达水平变化？如果能的话，是否能够说明致癌性有所提高？是否还需要做WESTERN BLOT验证？
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1楼 2013-09-14 11:35:34
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张力民1598

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
137167741: 金币+1, 小木虫交流，共同进步~~ 2013-09-15 21:26:09
我觉得应该从细胞生长，克隆形成能力，凋亡，成瘤能力等方面分析，单纯mRNA水平或蛋白水平的改变不太能说明问题。
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2楼2013-09-14 19:15:27
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feilinshiji

银虫 (小有名气)
★
137167741: 金币+1, 鼓励交流~~ 2013-09-15 21:26:16
引用回帖:
2楼: Originally posted by 张力民1598 at 2013-09-14 19:15:27
我觉得应该从细胞生长，克隆形成能力，凋亡，成瘤能力等方面分析，单纯mRNA水平或蛋白水平的改变不太能说明问题。

是这样的，我研究的是一个病毒，这种病毒能够在宿主体内诱发淋巴细胞瘤，老板让我研究一下改变淋巴细胞的通路对病毒产生的致瘤作用是否能产生抑制作用
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3楼2013-09-15 11:26:28
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青木书生

新虫 (初入文坛)
★
137167741: 金币+1, 小木虫交流，共同进步~~ 2013-09-16 08:07:30
引用回帖:
3楼: Originally posted by feilinshiji at 2013-09-15 11:26:28
是这样的，我研究的是一个病毒，这种病毒能够在宿主体内诱发淋巴细胞瘤，老板让我研究一下改变淋巴细胞的通路对病毒产生的致瘤作用是否能产生抑制作用...

目前最懒人的最花钱的办法就是系统生物学，打打蛋白组，基因芯片之类的。楼主的这个问法好像是做肿瘤预防免疫方面？？预先处理样本然后判断致瘤性？

采用real-time PCR检测出细胞癌基因的表达水平变化问的比较粗犷，当然有比较确凿的主线依据是可以的。
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4楼2013-09-15 23:01:25
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feilinshiji

银虫 (小有名气)
★
137167741: 金币+1, 小木虫交流，共同进步~~ 2013-09-16 08:07:47
引用回帖:
4楼: Originally posted by 青木书生 at 2013-09-15 23:01:25
目前最懒人的最花钱的办法就是系统生物学，打打蛋白组，基因芯片之类的。楼主的这个问法好像是做肿瘤预防免疫方面？？预先处理样本然后判断致瘤性？

采用real-time PCR检测出细胞癌基因的表达水平变化问的比较粗 ...

蛋白组和基因组以前的几个师兄都做过了，老板的意思是让我研究一下，在病毒感染过程中，几个信号通路对病毒致肿瘤作用的影响。国外都是用转基因小鼠为试验模型，我们实验室没有，所以我就只能想办法从细胞上着手。我的想法是用RNAi 阻断通路蛋白，然后用病毒去感染细胞，最后检测细胞转化水平。但是现在的问题是我不知道怎么来衡量这个致肿瘤性的大小。这位大侠，你有何高招？请指点一下吧
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5楼2013-09-15 23:45:25
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feilinshiji

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 张力民1598 at 2013-09-14 19:15:27
我觉得应该从细胞生长，克隆形成能力，凋亡，成瘤能力等方面分析，单纯mRNA水平或蛋白水平的改变不太能说明问题。

这位大侠，凋亡水平倒是好说，有现成的试剂盒。那么细胞生长、克隆形成能力、成瘤能力这些怎么评估？求指教，跪谢
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6楼2013-09-16 08:30:54
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张力民1598

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by feilinshiji at 2013-09-16 08:30:54
这位大侠，凋亡水平倒是好说，有现成的试剂盒。那么细胞生长、克隆形成能力、成瘤能力这些怎么评估？求指教，跪谢...

生长可以比较各组之间生长曲线的差异，克隆形成能力有一个叫克隆形成实验可以评价，成瘤能力可以做裸鼠成瘤实验。

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feilinshiji
7楼2013-09-16 12:11:00
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feilinshiji

银虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
7楼: Originally posted by 张力民1598 at 2013-09-16 12:11:00
生长可以比较各组之间生长曲线的差异，克隆形成能力有一个叫克隆形成实验可以评价，成瘤能力可以做裸鼠成瘤实验。
...

我这个病毒在小鼠上没有易感性。。。不过非常感谢你的建议
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8楼2013-09-16 14:26:14
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