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紫拙

木虫 (正式写手)

[求助] 十万火急,小弟实验室的PC12细胞最近总是被污染(有图),求解救办法 已有3人参与

小弟养PC12细胞快一年了,原本十分好养的,但最近几个月里面细胞培养基很容易长其他东西,感觉有细菌又有真菌:培养基发黄,而且很浑浊,里面有漂浮着的成串的球状菌,刚开始球装菌较少,用PBS也洗不干净,后来越来越多,十二小时内培养基颜色变黄,细胞数目不断减少,在肉眼下观察,可以看到培养基表面有白色漂浮物,加了抗生素也没有作用(实验室用的是1640培养基,5%马血清和10%胎牛血清),传到三四代左右就长菌,而且细胞生长很慢,实验室的培养基验过菌,空培养基放两个礼拜也没有染菌,应该没问题啊
     附上图片,请各位大侠告诉我这是什么菌,怎么样去除以及如何避免,在下感激不尽!!!
     (圆圈内是长的球状物,箭头是PC12细胞)
十万火急,小弟实验室的PC12细胞最近总是被污染(有图),求解救办法
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十万火急,小弟实验室的PC12细胞最近总是被污染(有图),求解救办法-1
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十万火急,小弟实验室的PC12细胞最近总是被污染(有图),求解救办法-2
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十万火急,小弟实验室的PC12细胞最近总是被污染(有图),求解救办法-3
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十万火急,小弟实验室的PC12细胞最近总是被污染(有图),求解救办法-4
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及锋而试一行幽径,乘清风以共明月,九华苍穹,沥北斗而见天权
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紫拙

木虫 (正式写手)

引用回帖:
13楼: Originally posted by 小小苦瓜脸 at 2015-02-12 21:19:59
亲,你上的图是真菌还是细菌的?
另外你是做了处理细胞长好了还是直接扔掉重新来的?
不好意思,真是和你一模一样才问你问得这么着急。

因为我的细胞以前有很多冻存的,所以是直接扔了,之前有加过抗生素,用PBS洗,但依然没啥效果,后面就直接扔了,避免污染其他细胞
及锋而试一行幽径,乘清风以共明月,九华苍穹,沥北斗而见天权
15楼2015-02-12 23:56:16
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mada1986

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香。分子生物期待你更多精彩 。 2013-09-13 08:24:21
用的所有器械和试剂换新的或者重新灭菌,培养箱甲醛处理,祝你好运
3楼2013-09-13 08:08:06
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紫拙

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by mada1986 at 2013-09-13 08:08:06
用的所有器械和试剂换新的或者重新灭菌,培养箱甲醛处理,祝你好运

谢谢啊,但能不能知道这是什么污染呢
及锋而试一行幽径,乘清风以共明月,九华苍穹,沥北斗而见天权
4楼2013-09-19 22:47:58
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dingchui

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

只能是在灭菌和操作过程中多注意些,培养基配制的时候一定要注意细节,而且要验菌,任何一步不小心都会前功尽弃。我们用DMEM培养基
5楼2014-03-28 21:53:30
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