应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 家蚕表皮二维电泳图
51/1返回列表
查看: 508  |  回复: 3
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

yhz918

新虫 (初入文坛)

[求助] 家蚕表皮二维电泳图

请问各位大侠，为什么我的电泳图跑成这样，银染的。。
回复此楼

» 本帖附件资源列表

  • 欢迎监督和反馈：小木虫仅提供交流平台，不对该内容负责。
    本内容由用户自主发布，如果其内容涉及到知识产权问题，其责任在于用户本人，如对版权有异议，请联系邮箱：xiaomuchong@tal.com
  • 附件 1 : C108表皮2013.8.5.tif
    • 2013-09-05 18:39:51, 1.71 M

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

蛋白质生物学实验经验

» 猜你喜欢
踏实做好每件事
1楼 2013-09-05 18:41:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

凌波丽

专家顾问 (知名作家)
你的图我还不会传，下次就把图直接贴出来。
赞一下 回复此楼

» 本帖附件资源列表

  • 欢迎监督和反馈：小木虫仅提供交流平台，不对该内容负责。
    本内容由用户自主发布，如果其内容涉及到知识产权问题，其责任在于用户本人，如对版权有异议，请联系邮箱：xiaomuchong@tal.com
  • 附件 1 : [emuch.net][2330699]C108表皮2013.8.5.tif
    • 2013-09-06 00:25:21, 1.71 M
3楼2013-09-06 00:23:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 4 个回答

凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+2, 赠人玫瑰，手有余香。分子生物期待你更多精彩 。 2013-09-06 08:24:40
横纹众多，应该是聚焦不完全。

原因与对策：
1.样品没有完全溶解，上样前确保样品完全溶解并且保持稳定。
2.样品中存在干扰IEF的物质存在，改进样品制备方法，可用分子筛、超滤、透析等纯化蛋白质样品。
3.样品中存在存在干扰IEF的离子。可用超滤、透析等纯化蛋白质样品降低离子强度（离子浓度要小于10mmol/L)；或者用TCA、丙酮沉淀蛋白质，然后用缓冲溶液重新溶解被沉淀的蛋白质（当然弃去TCA、丙酮）。
4.做等电聚焦时离子型去垢剂太多时也会出现横纹，将样品用超滤、透析去掉离子型去垢剂，改用离子型去垢剂替代之。
5.上样量过大。需要适当减少上样量。
6.聚焦时间过短使得聚焦不完全。需要适当延长聚焦时间。
7.聚焦时间过长，引起胶内渗水，并且改变了凝胶的内部的电场微环境，使得蛋白质样品再次发生移动，导致横纹。电泳时间不能过长。
8.楼主实验用的水是不是也有问题。应该用超纯水。
赞一下 回复此楼
2楼2013-09-06 00:20:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yhz918

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 凌波丽 at 2013-09-06 00:20:58
横纹众多，应该是聚焦不完全。

原因与对策：
1.样品没有完全溶解，上样前确保样品完全溶解并且保持稳定。
2.样品中存在干扰IEF的物质存在，改进样品制备方法，可用分子筛、超滤、透析等纯化蛋白质样品。
3.样 ...

谢谢，我们这边用的是二级水，我后面减少上样量试试。。
赞一下 回复此楼
踏实做好每件事
4楼2013-09-06 10:28:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 4 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭