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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 液相走葡萄糖、果糖、蔗糖三个标准品出峰一模一样，保留时间也很短，求解救！
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usstcyq

新虫 (初入文坛)

[求助] 液相走葡萄糖、果糖、蔗糖三个标准品出峰一模一样，保留时间也很短，求解救！ 已有3人参与

本人液相新人，最近在用安捷伦1200做一个果汁样品里的三种糖和三种有机酸（酒石酸、苹果酸、柠檬酸）先说糖的问题，柱子是氨基柱zorbax NH2，250*4.6mm，rid检测器，流动相是乙腈：水=7:3和7.5:2.5都试过了，流速1ml/min，分别进三种标准品（单标），但是跑出来保留时间都只有3min左右，而且三种糖的单标出峰时间和峰形居然都差不多，这柱子和标准品本身肯定都没有问题，我的标准品配的是0.1mg/ml的浓度，就是蒸馏水配的，混标我也进了，分不开，就还是在三分钟的时候出一个峰，后面就没有了（我走到20min才停的）
还有有机酸也有问题，我用C18柱做的，流动相是98%磷酸氢二铵（ph=3左右）+2%甲醇，我先进标准品，三种标准品保留时间都只有一两分钟，峰也长的差不多，我快崩溃了，求大神解救。。。
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1楼 2013-09-04 20:42:20
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mao398019986

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我也是做糖的，要分离蔗糖葡萄糖果糖，我用的是KS801，专门的糖柱分离柱。其他的我不太懂，你可以换换柱子。我新买的柱子，刚开始用，混合3糖进样，分离的还不错。
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2楼2015-11-24 22:10:19
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w9412

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

C18柱子可以用来检测糖？
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液相，分析纯化，多肽蛋白
3楼2015-11-25 13:13:16
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xuyingemail

新虫 (小有名气)
糖的问题：色谱柱不合适，考虑换用糖柱。
酸的问题：酸极性大，在C18柱上保留太弱。建议换用T3柱或别的色谱柱，缓冲盐的pH值需要根据三种酸的pKa值调整，及pH<pKa-2或pH>pKa+2，同时注意不要超过了色谱柱耐受的pH范围。
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4楼2015-11-25 17:29:20
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cxy8023

银虫 (初入文坛)
分不开 用了无数次
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路漫漫其修远兮吾将上下而求索
5楼2015-11-27 16:26:31
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cxy8023

银虫 (初入文坛)
改用糖柱能分得开
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路漫漫其修远兮吾将上下而求索
6楼2015-11-27 17:21:41
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小南摧摧

禁虫
本帖内容被屏蔽
7楼2022-03-02 10:54:31
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hncuwz

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

我猜测你三分钟的峰可能是水峰，是不是检测器没有平衡好?
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pigment
8楼2022-03-02 11:03:35
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