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1989zb

金虫 (小有名气)

[交流] RNA反转录 已有6人参与

提取的RNA如果有酒精残留会不会对反转录造成严重的影响??  会影响后面cDNA的合成吗 ????
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2008101111

金虫 (正式写手)

学术江湖混子

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小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2013-09-05 14:34:14
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-09-28 22:38:06
引用回帖:
5楼: Originally posted by 喔喔0208 at 2013-09-05 11:10:01
您好,我刚开始做这方面,麻烦问一下,原核的16S rRNA和它的16S rDNA是什么样的关系,我要用肺炎链球菌的16S rRNA做菌种鉴定,一定需要做RNA的反转录才能做PCR吗,还有如果要做反转录麻烦提供一下都需要什么试剂, ...

RNA结构不稳定,极易污染降解,在PCR过程中,高温会使RNA降解,需要反转成cDNA稳定的结构,用于进一步的试验,反转过程买个试剂盒就好的,按说明书做就好
自主创业者,捣腾生物试剂
6楼2013-09-05 11:24:46
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随波逐刘

新虫 (小有名气)

★ ★ ★
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gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助! 2013-09-04 20:54:49
如果很多的话,会影响酶活性吧,特别是如果有盐离子的时候,醇沉淀之后尽量去除乙醇,干燥后溶解。。。我室温下干燥5min左右差不多了。。。
2楼2013-09-04 19:55:21
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1989zb

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 随波逐刘 at 2013-09-04 19:55:21
如果很多的话,会影响酶活性吧,特别是如果有盐离子的时候,醇沉淀之后尽量去除乙醇,干燥后溶解。。。我室温下干燥5min左右差不多了。。。

哦 症状很相似的病料,就是不知道怎么提取的RNA 总是p不出来
3楼2013-09-04 21:09:35
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2008101111

金虫 (正式写手)

学术江湖混子

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流! 2013-09-05 14:33:59
酒精一定要吹干蒸发干净,酒精会使核酸沉淀不溶,影响下一步的试验
自主创业者,捣腾生物试剂
4楼2013-09-05 09:44:09
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