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2008101111金虫 (正式写手)
学术江湖混子
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[求助]
[求助/交流]如何提高自己DIY的柱式胶回收试剂盒的回收效率？
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 最近自己搜集了柱式胶回收试剂盒各个溶剂的配方，经过几轮的试验，总算能够回收到PCR产物，但是回收的效率估计只有50%左右，敢问各位有没有好的建议和方法来提高一下回收效率？或者有更好的配方给我建议一下？ |
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 分子生化实验经验积累 |
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2008101111
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9楼2013-09-05 11:32:31
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【答案】应助回帖
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2008101111: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-10-14 22:19:44
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| 我感觉楼主的回收效率已经很高了。但以前做的时候想到的提高效率的也就几个方面：1.溶胶。这一部分可以适当提高温度。2.上柱。由于是高盐结合，低盐洗脱，适当提高盐浓度应该有利（推测）3.洗脱。我以前一直用纯水洗脱而且一定要65到70摄氏度水浴，适当延长时间。估计这步是影响收率的关键。由于洗脱体积一般都很小30~50ul，柱心和边缘的洗脱效果是不同的，适当加大洗脱体积会提高总收率，但浓度下降。重复洗脱的作用是有的但不明显。能想到的就这些。仅供楼主参考。 |
4楼2013-09-05 10:55:13
