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2008101111

金虫 (正式写手)

学术江湖混子

[求助] [求助/交流]如何提高自己DIY的柱式胶回收试剂盒的回收效率?

最近自己搜集了柱式胶回收试剂盒各个溶剂的配方,经过几轮的试验,总算能够回收到PCR产物,但是回收的效率估计只有50%左右,敢问各位有没有好的建议和方法来提高一下回收效率?或者有更好的配方给我建议一下?
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自主创业者,捣腾生物试剂
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Haibara_Ai

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
2008101111: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-09-05 11:33:44
2008101111(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香。分子生物期待你更多精彩 2013-09-05 15:00:34
2008101111: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-10-14 22:20:28
这个可以么?
5.5 M guanidine thiocyanate (GuSCN)
20 mM Tris HCl pH 6.6
5楼2013-09-05 11:06:38
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查看全部 10 个回答

gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主


myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香。分子生物期待你更多精彩 2013-09-05 15:01:02
你的想法很好,估计没有人想到会自己DIY胶回收,能否分享出你的配方?
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
2楼2013-09-04 21:00:03
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2008101111

金虫 (正式写手)

学术江湖混子

引用回帖:
2楼: Originally posted by gyesang at 2013-09-04 21:00:03
你的想法很好,估计没有人想到会自己DIY胶回收,能否分享出你的配方?

配方还在试验中,目前效果不错,如果分享了配方,估计会招来试剂公司的恶骂了,哈哈哈
自主创业者,捣腾生物试剂
3楼2013-09-04 21:13:11
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hl16010921

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香。分子生物期待你更多精彩 2013-09-05 15:00:26
2008101111: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-10-14 22:19:44
我感觉楼主的回收效率已经很高了。但以前做的时候想到的提高效率的也就几个方面:1.溶胶。这一部分可以适当提高温度。2.上柱。由于是高盐结合,低盐洗脱,适当提高盐浓度应该有利(推测)3.洗脱。我以前一直用纯水洗脱而且一定要65到70摄氏度水浴,适当延长时间。估计这步是影响收率的关键。由于洗脱体积一般都很小30~50ul,柱心和边缘的洗脱效果是不同的,适当加大洗脱体积会提高总收率,但浓度下降。重复洗脱的作用是有的但不明显。能想到的就这些。仅供楼主参考。
4楼2013-09-05 10:55:13
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