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高洁琼

金虫 (正式写手)

[求助] 关于小鼠MCAO模型。。。 已有2人参与

我们实验室里建的小鼠MCAO模型总是活不长久,经常第二天就死掉一半。。。但是文献中看到有的实验室小鼠模型能存活一周。群里有做过小鼠MCAO的吗?
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Nothing~seek,nothing~find.
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bravelion

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
高洁琼: 金币+3, ★★★很有帮助, 谢谢指点 2013-09-03 19:05:50
影响小鼠MCAO模型的因素非常多,比如鼠的状态,血气,手术操作技巧,线栓的阻断时间等等,我们实验室长期用MCAO 模型致力于神经保护的研究,已在 Stroke , JCBFM, Anesthesiolgy 等权威杂志发表多篇文章论文。我的经验是做MCAO模型,手术操作时间很重要,我们一般在7分钟内能做完一只鼠,成功率85%以上。手术操作时间长,死亡率就高。当然,还有很多……。
随缘来去;活在当下
2楼2013-09-03 17:55:30
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高洁琼

金虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by bravelion at 2013-09-03 17:55:30
影响小鼠MCAO模型的因素非常多,比如鼠的状态,血气,手术操作技巧,线栓的阻断时间等等,我们实验室长期用MCAO 模型致力于神经保护的研究,已在 Stroke , JCBFM, Anesthesiolgy 等权威杂志发表多篇文章论文。我的经 ...

请问你们缺血时间多久?30min还是60min?  线栓有什么特殊要求吗?我们组是自己做的线栓,并且全程监测脑血流。 线栓是从颈外还是颈总进的?另外手术后死亡率有多高?。。。比如:鼠的血气是指什么呢?问题有点多,不好意思。我比较疑惑的是,我们实验室做MCAO最熟练的师兄也就是10min一只,是否方便告诉我你的具体实验操作呢?  谢谢,或者给你们文章的链接,我去借鉴你们的方法也行。
Nothing~seek,nothing~find.
3楼2013-09-03 18:12:44
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bravelion

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 高洁琼 at 2013-09-03 18:12:44
请问你们缺血时间多久?30min还是60min?  线栓有什么特殊要求吗?我们组是自己做的线栓,并且全程监测脑血流。 线栓是从颈外还是颈总进的?另外手术后死亡率有多高?。。。比如:鼠的血气是指什么呢?问题有点多, ...

不好意思,最近很忙,没有及时回复你。
MCAO 缺血时间的长短,取决于你的实验内容,短暂缺血如:30min, 60min 或者90min 我都做过,当然缺血时间越长,动物的死亡率就会高。不过我们做过永久性缺血的MACO,这个是损伤和死亡率最高的,我们的死亡率大约是 做5个死1个。另外,大鼠的死亡率很低,相比之下,小鼠的死亡率较高。其实MCAO 模型是最适合大鼠的。血气是指动物动脉血中的氧分压,二氧化碳分压等。我们做MCAO时,一般给动物吸入氧气,防止动物缺氧窒息。另外,我们用的栓子是在日本公司购买的专门用于MCAO的线栓。
随缘来去;活在当下
4楼2013-09-05 10:12:13
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peach7715

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

您好,我最近做C57小鼠的MCAO出现了很多问题。主要问题是: 要么没有坏死,要么从后面开始坏死,海马出现明显的坏死,然后更费解的是,好几只老鼠的都是,MCAO24小时后行为学很严重,但是TTC染色没有发现坏死的。
请问您,做C57小鼠的MCAO手术的话,有什么特别需要注意的吗?能传授点经验吗?谢谢!
5楼2013-09-18 15:17:51
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2979859228

新虫 (初入文坛)

本帖内容被屏蔽

6楼2013-10-25 16:26:17
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ebooker

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

手术要快,时间要短,我一般一小时做4只。
书籍备而不读如废纸!
7楼2014-01-07 12:59:30
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syw1984

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by bravelion at 2013-09-05 10:12:13
不好意思,最近很忙,没有及时回复你。
MCAO 缺血时间的长短,取决于你的实验内容,短暂缺血如:30min, 60min 或者90min 我都做过,当然缺血时间越长,动物的死亡率就会高。不过我们做过永久性缺血的MACO,这个是 ...

栓子可以看一下广州佳灵生物技术有限公司的,很不错。我们实验室一直使用,价格比进口线栓便宜多了。成模率在90%以上,关键是梗死比较均一稳定。
8楼2015-01-21 15:32:25
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syw1984

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

影响MCAO实验成功与否的因素很多。本人做过10多年的MCAO实验,对MCAO实验有一点浅显的认识,可以与大家分享下,不对的地方欢迎大家指正。

1、动物的存活时间问题。动物的大小对存活率有显著影响。动物越小,死亡率越高。我们的经验是一般选择250 g-350 g的大鼠。
2、梗死大小及稳定性。影响梗死大小和稳定性的关键因素是线栓。这里不建议大家自己做线栓使用,由于缺乏专业的设备,制备的线栓差别比较大,要不就是直径差别大,要不就是线头不够圆滑,导致线栓难以插入血管,或者极易造成颅底出血。线头直径不同,导致梗死差异大。市场上现在有多家销售MCAO线栓的公司,其销售的线栓材质也不同,有硅胶的,有石蜡的,有多聚赖氨酸的,有指甲油等等。目前广州佳灵生物技术有限公司的硅胶线栓卖的不错,是所有硅胶线栓当中质量最好的,跟doccol的进口线栓差不多,动物存活率高,成模率高,价格也比同类产品低很多。建议大家采用硅胶线刷,以前用多聚赖氨酸的线栓,发文章时,有个审稿人提出了质疑,让我用多普勒检测下血流看看,是否有再灌。理由是多聚赖氨酸可以损坏血管内皮细胞,诱发血栓形成,造成再灌不充分。所以建议大家还是用硅胶线栓。
3、关于颅底出血的问题。造成颅底出血的原因主要有两个,一是线栓插入太深,二是线栓头端处理不好,刺破血管。颅底出血在多聚赖氨酸造模过程中较为常见。
4、 关于多久后处死动物的问题。很多实验室一般都是在24 小时后处死动物。但是有人质疑24 h时脑梗死还处于发展过程中,此时处死动物评价药效不够准确。因此建议大家72 h或者1周后处死动物。

。。。。。。。。。。。。。。。。。。。待续。
9楼2015-01-21 15:49:34
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梦昵dew

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
8楼: Originally posted by syw1984 at 2015-01-21 15:32:25
栓子可以看一下广州佳灵生物技术有限公司的,很不错。我们实验室一直使用,价格比进口线栓便宜多了。成模率在90%以上,关键是梗死比较均一稳定。...

我想问一下这个公司的线栓标准吗?可靠不。最近想买线栓,不知道买哪家好~
10楼2015-03-19 10:17:34
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