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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 出峰时间？
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cpugel

[交流] 出峰时间？

一个药物的HPLC，出峰时间
    甲醇：水＝90：10，pH7.0时 2.5min
     甲醇：水＝90：10，pH7.5时 1.8min
     甲醇：水＝85：15，pH7.5时  1.8min
     甲醇：水＝80：20，pH7.0  不出峰
   甲醇：水＝80：20，不调pH,  1.6min
                 （pH均用三乙胺和磷酸调节）

出峰时间比较短，出现这样的情况是怎么回事，要延长出峰时间，各位高手看看该怎么办？
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1楼 2007-11-19 08:55:29
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magictang

木虫 (正式写手)

独孤求败
★
karl2100(金币+1,VIP+0):3Q
正常情况下反相色谱柱延长出峰时间只需要降低有机相比例就行了，正相的则相反，按你提供的上述信息，应该是反相的，你不调酸碱，直接降低有机相比例，然后让他走就是了，看看究竟多少分钟出峰，正常每5个百分比调节试试

[ Last edited by magictang on 2007-11-19 at 09:12 ]
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2楼2007-11-19 09:01:40
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某某某

金虫 (初入文坛)
你用的什么柱子啊？怎么这快就出峰？说一下具体情况看看。
甲醇：水＝80：20，不调pH,  1.6min    不调是多少啊？
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3楼2007-11-19 13:45:58
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cpugel

DIKMA  C18柱
不调pH就是配完流动相，不测也不调节，具体不知道，85%甲醇是7.4
80%甲醇也差不了多少吧。
我用75%甲醇调至pH7，也不出峰。
有没有这样的情况，流动相的pH对出峰时间或能不能检出有很大影响？
   甲醇：水＝90：10，pH7.0时 2.5min
     甲醇：水＝90：10，pH7.5时 1.8min
以上两个比较，好像应该降低pH
     甲醇：水＝80：20，pH7.0  不出峰
   甲醇：水＝80：20，不调pH,  1.6min
这两个比较，好像pH对结果影响很大
  甲醇：水＝90：10，pH7.0时 2.5min
   甲醇：水＝80：20，pH7.0  不出峰
这两个比较，流动相比例又很重要，
究竟该怎么调节呢？
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4楼2007-11-19 14:17:29
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supersufang938

木虫 (正式写手)
增加流动相中水的比例，或者采用其他流动相：缓冲盐类
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5楼2007-11-19 15:58:18
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happymoon06

金虫 (小有名气)
★
karl2100(金币+1,VIP+0):谢谢您参与讨论！
如果是反相柱，甲醇：水＝80：20，pH7.0应该比 甲醇：水＝90：10，pH7.0后出峰，采集时间长点看看，从你提供信息看，那个成分应该还在柱子里未洗脱下来。
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6楼2007-11-23 20:20:45
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poeyoung

铜虫 (小有名气)
★
karl2100(金币+1,VIP+0):3Q
反相柱。ph7.0比 ph 7.5 跑的时间长，我觉得看样子这个化合物的PKa应该大于7，而且似乎应该是酸吧。那么调pH值到5或者6是什么结果呢？
另外，楼上们也都说了，减小有机相比例，可以增长出锋时间。
但是，这些都是在合适的pH值下，才能实现的。
所以，建议先降ph值，然后在固定的ph值下，再调有机相比例。
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7楼2007-11-25 20:31:30
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shijiehua

金虫 (初入文坛)
分析样品属酸性还是碱性化合物?
你能确定所出的峰是样品峰?
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8楼2007-11-26 10:42:46
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