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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 如何在DNA戊糖上的3‘位或5’上的羟基上标记上荧光分子？
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MHTBG

金虫 (小有名气)

[求助] 如何在DNA戊糖上的3‘位或5’上的羟基上标记上荧光分子？

如何在DNA戊糖上的3‘位或5’上的羟基上标记上荧光分子？
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StruggleForMyBeautifulDream!
1楼 2013-08-26 18:50:54
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fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲，勿施于人

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
MHTBG: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2013-09-12 18:30:45
一般短的都可以在合成的时候定制标记荧光基团, 大概少于60nt的都可以合成, 你直接跟DNA合成的公司说你要什么荧光,要在5'或者3'就好了
长些的,双链可以用个带荧光的引物做primer直接跑个PCR,标记在5'端, 3'端不知道怎么标记
单链可以用TdT标记在3'端. 5'端一般都是用T4 PNK做放射性标记, 荧光标记不知道怎么搞
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MHTBG
The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
4楼2013-08-27 23:17:24
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fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲，勿施于人
信息太少了吧
你这个DNA有多长?
双链的还是单链的?
是合成出来的还是P出来的?
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The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
2楼2013-08-26 23:45:59
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MHTBG

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2013-08-26 23:45:59
信息太少了吧
你这个DNA有多长?
双链的还是单链的?
是合成出来的还是P出来的?

由于我是非生物专业的，门外汉一个，还请多指导啊，谢谢！
我想多了解点：对合成的和P的（1）如果是长链ssDNA的话，该怎么标记？（2）短链的ssDNA怎么标记？
（3）长链的dsDNA怎么标记？
（4）短链的dsDNA又该怎么办呢？

问题有点多，麻烦了
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StruggleForMyBeautifulDream!
3楼2013-08-27 08:55:47
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MHTBG

金虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2013-08-27 23:17:24
一般短的都可以在合成的时候定制标记荧光基团, 大概少于60nt的都可以合成, 你直接跟DNA合成的公司说你要什么荧光,要在5'或者3'就好了
长些的,双链可以用个带荧光的引物做primer直接跑个PCR,标记在5'端, 3'端不知道 ...

太谢谢你了，我再好好研究研究！！！
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StruggleForMyBeautifulDream!
5楼2013-08-28 20:52:47
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