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细菌基因组DNA为什么提不出来？
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提了两次红球菌的基因组DNA都没结果，请大家帮忙分析分析是什么原因。 具体步骤是： 1、 50ml细菌过夜培养，取1.5ml 4000rpm离心10min 弃上清液，再浓缩一次 2、加567ulTE 30ul ,10%sds,3ul 20mg/ml 蛋白酶K，混匀，于37度温浴1h 3、加100ul 5mol/l Nacl ,加80ul CTAB/NACL，混匀，于65度温浴10min 4、加等体积的氯仿/异戊醇，混匀，10000rpm 4度 离心5min 将上清液转移到新管中 5、加等体积的酚/氯仿/异戊醇 混匀 10000rpm 4度 离心5min 将上清液转移到新管中 6、加0.6体积的异丙醇，轻轻混合直到DNA沉淀下来，将沉淀转移至1ml 70%乙醇中洗涤 7、离心5min ,弃上清液,干燥，重溶于100ul的TE缓冲液 每次做到第六步都没发现有DNA沉淀，不知道什么原因，很着急，麻烦高手指教。多谢！ [search]基因组DNA[/search] |
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reasonspare
木虫 (著名写手)
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2楼2007-11-14 23:38:58
hudong
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4楼2007-11-15 09:45:29