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sinopet

铁杆木虫 (著名写手)

[求助] 食品污染,帮忙看看可能是那种细菌?

面食表面,粘湿,大红色,易擦去,略有霉味。有对此熟悉的同学吗?可能是哪个属的细菌?怎么鉴定比较简易便捷?
食品污染,帮忙看看可能是那种细菌?
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wzq_ing

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
sinopet: 金币+1, 有帮助 2013-08-23 12:45:53
貌似细菌污染,有条件涂个片子先看下菌体形态,详细具体的说是神马菌,要做鉴定
2楼2013-08-23 09:11:59
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skpom

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
sinopet: 金币+2, 有帮助 2013-09-02 08:21:54
应该是霉菌,
细菌可能性较小,以为细菌产色素较慢,看这片子不可能是细菌,
建议涂个平板分离纯化一下,通过生理生化鉴定,结合16RDNA鉴定
一、DNA的提取
1、细菌培养:细菌接种于5ml液体培养基中,37度培养2天
2、菌体收集:取1.5ml离心管加入1.5ml菌液12000r/min离心1分钟,收集菌体,去尽培养菌,在沉淀中加入500微升的TE缓冲液,用吸管反复吹打使之悬浮。
3、将其放入-20度冰箱反复冻融3-4次,融时将其放入热水融化,60度左右。
4、加入60微升10%SDS和10微升20mg/ml蛋白酶K混匀,于37度水浴反应1h。
5、加入100微升浓度为10mol/L CTAB溶液及80微升浓度为5mol/L Nacl溶液混匀65度水浴保温20分钟,得到粗提取液。
6、在此粗提液中加入等体积酚氯仿异戊醇(体积比25:24:1)颠倒混匀5分钟在转速12000r/min离心10分钟,取上清并加入氯仿异戊醇(24:1)颠倒混匀,12000r/min离心5-10分钟弃下层物,重复一次。
7、吸取上清,加两倍体积的无水乙醇和1/10体积的3M醋酸钠-20度放置1小时或过夜。在转速12000r/min离心10分钟,弃去上清得到DNA沉淀。
8、用70%的乙醇(大约1ml)洗涤DNA沉淀两次,并在空气中自然干燥或风干。
9、最后用30-60微升已灭菌的ddH2o溶解DNA,并加入适量的RNaseA,37度半小时除去RNA杂质,电泳检测,放入-20度保存。
二、PCR检测并大量扩增
1. 在 PCR 反应管中配置 50μL 反应体系:5μL 10×buffer,4μL dNTPs,两种引物各0.5μL,2μL DNA 模板(或 1μL 异养细菌纯培养菌液),0.25μL Taq DNA 聚合酶,其余体积以无菌超纯水补足。每次 PCR 反应中均设置作为参照的阴性样品,即反应溶液中以相等体积的无菌超纯水替代 DNA 模板;
2. 将 PCR 反应管放置于扩增仪进行反应,扩增条件为:94℃热启动 3min,30 个循环为 94℃变性 30s,58℃退火 45s,72℃延伸 105s;最后一个循环结束后 72℃延伸7min;
携手共创科技论坛
3楼2013-08-30 11:39:02
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sinopet

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by skpom at 2013-08-30 11:39:02
应该是霉菌,
细菌可能性较小,以为细菌产色素较慢,看这片子不可能是细菌,
建议涂个平板分离纯化一下,通过生理生化鉴定,结合16RDNA鉴定
一、DNA的提取
1、细菌培养:细菌接种于5ml液体培养基中,37度培养2天 ...

不是霉菌,是细菌!
4楼2013-09-02 08:21:43
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zhangbighui

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感觉像细曲霉,这么看看不出来什么,做一下镜检才知道的。
成功,就是成为你想成为的人
5楼2013-09-02 09:11:30
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icyair_01

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

有的放线菌也是紫红色的,菌落比较湿润
6楼2013-09-02 17:17:17
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