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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 生物制药 » 除去蛋白质
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红魔亮亮

金虫 (正式写手)

[求助] 除去蛋白质

，大家好，请教大家一个问题，当酶催化反应后，该怎样出去反应液中的酶？
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奋斗，坚持到底。
1楼 2013-08-19 15:40:19
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whdxhxy

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
红魔亮亮: 金币+15, ★★★很有帮助 2013-08-19 22:14:17
不知道你的是什么体系：
1，可以加热煮沸，这个时候蛋白沉淀，离心除去沉淀。
2，用变性试剂沉淀，（如有些蛋白对三氯乙酸比较敏感），离心除去。
3，用有机溶剂抽提反应体系，蛋白质沉淀，化合物被抽提出来。
以上只是我的一些经验，仅供参考。
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3楼2013-08-19 21:54:01
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红魔亮亮

金虫 (正式写手)
注：产物容易分解，所以反应结束后，没有加热除去部分酶。
     反应液是有机-水混溶体系。
     我试了sevage除蛋白，可是效果不是很好，而且需要不断反复，使产物损失较大。
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奋斗，坚持到底。
2楼2013-08-19 15:40:51
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红魔亮亮

金虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by whdxhxy at 2013-08-19 21:54:01
不知道你的是什么体系：
1，可以加热煮沸，这个时候蛋白沉淀，离心除去沉淀。
2，用变性试剂沉淀，（如有些蛋白对三氯乙酸比较敏感），离心除去。
3，用有机溶剂抽提反应体系，蛋白质沉淀，化合物被抽提出来。
...

你好，我做是dmso -水的反应体系。
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奋斗，坚持到底。
4楼2013-08-20 09:41:07
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whdxhxy

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
红魔亮亮: 金币+15, ★★★很有帮助 2013-08-22 15:59:51
引用回帖:
4楼: Originally posted by 红魔亮亮 at 2013-08-20 09:41:07
你好，我做是dmso -水的反应体系。...

你说产物易分解，不知道是对热不稳定还是对酸或碱不稳定，对热不稳定就不能加热除蛋白，可以用三氯乙酸变性。
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5楼2013-08-20 11:00:14
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