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mawei268

银虫 (初入文坛)

[求助] 半制备液相收集得到的多肽样品中三氟乙酸的去除

使用安捷伦半制备液相对一个多肽样品进行分离纯化，收集得到集分后要打质谱，但是由于流动相中含有0.05%的三氟乙酸（流动相为乙腈与水的混合溶液），如果直接对集分进行旋蒸，可能会造成三氟乙酸在集分中浓缩而使样品降解，有没有什么好的方法可以在进行旋蒸浓缩前除去三氟乙酸？
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1楼 2013-08-12 08:59:24
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shale1983

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
楼主，您的多肽不是在TFA条件下裂解的吗？  您在制备过程中，用到的TFAbuffer 里TFA的浓度才0.1% ，一般没有问题。
另外，你应该是在减压条件浓缩的，TFA 的沸点比水要低，所以TFA应该现于水出来。浓度不会增大太多
其实我在实际操作中发现温度可能更重要。你要尽量提高真空度，降低浓缩时的温度。
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2楼2013-08-12 13:08:13
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mawei268

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by shale1983 at 2013-08-12 13:08:13
楼主，您的多肽不是在TFA条件下裂解的吗？  您在制备过程中，用到的TFAbuffer 里TFA的浓度才0.1% ，一般没有问题。
另外，你应该是在减压条件浓缩的，TFA 的沸点比水要低，所以TFA应该现于水出来。浓度不会增大太多 ...

多肽不是在TFA条件下裂解的，只是通过半制备液相根据分子量的不同进行收集的，后期因为要进质谱，所以TFA必须尽可能的去除干净
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3楼2013-08-13 10:11:34
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shale1983

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

不明白楼主的意思,有TFA存在影响你的质谱吗？
还是您的多肽在酸性条件下不稳定？
我们经常用含TFA的样品做质谱，没有什么影响啊。
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4楼2013-08-13 18:10:33
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bigboy1973

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
用凝胶柱子就可以除去 比如g25 lh20.。。。。。。。。
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I\will be back!!!
5楼2013-08-13 20:40:43
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