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小木虫刘树青

木虫 (著名写手)

夜未眠

[求助] 细胞计数“稀释倍数”相关问题已有1人参与

我查看了许多有关“细胞计数板使用方法”的介绍但都是,类型、计算公式方面的问题,而有关“稀释倍数”问题多是模糊带过。希望小木虫的高手帮我解惑!!!谢谢!!!
计算公式多为两种:
1、(细胞数)/ml=(四大格细胞数/4)*10^4*稀释倍数
2、(细胞数)/ml=(80小格细胞数/80)*10^4*稀释倍数  或  (细胞数)/ml=(100小格细胞数/100)*10^4*稀释倍数
问题是:假如细胞离心后用1ml重悬,再从中取100ul的重悬液,再加100ul的PBS稀释,这里是稀释了两倍吗?那么根据公式算出的是1ml重悬液的细胞数,还是100ul的细胞数啊?还有就是向载玻片上加细胞液时多少都无所谓是吧?只要不是太多就行是吧?
请高手详解“稀释倍数问题”,谢谢!!!
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世界上只有一种真正的英雄主义,那就是看清生活的真相之后,依然热爱生活。
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yakir

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
silicare: 金币+5, 谢谢参与 2013-08-21 18:12:28
silicare: 应助指数+1 2013-08-21 18:12:33
稀释倍数指的是染色液(一般用台盼蓝)稀释细胞的倍数,我们一般是1:1稀释。
举个例子:染色前的细胞取10ul,加入10ul的台盼蓝,吹打混匀,加入到血球计数板中,血球计数板内的空间有限的,蓝色全部覆盖就行,多了会溢出的,不过溢出一点也没有关系。这样数出来的细胞数是染色前的细胞数量,譬如你4个大格数出来的是200个细胞,那染色前的细胞数就是200/4×2(这里的2是细胞被台盼蓝稀释了一倍)×10四次方。至于你在计数前怎么稀释的,你可以理解为和这个公式没有关系。不至于计数前的细胞数都知道,原先的细胞数还算不出来吧。。。。
一步一步!
13楼2013-08-20 17:01:19
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她城无岁月

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
用不着那么复杂的吧 每次培养好的细胞取2ul   蓝色的液体4ul这样比例为1:3 之后混匀 全加入载玻片  进行细胞计数就可以了。
2楼2013-08-11 23:04:05
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小木虫刘树青

木虫 (著名写手)

夜未眠

引用回帖:
2楼: Originally posted by 她城无岁月 at 2013-08-11 23:04:05
用不着那么复杂的吧 每次培养好的细胞取2ul   蓝色的液体4ul这样比例为1:3 之后混匀 全加入载玻片  进行细胞计数就可以了。

请问你仔细看问题了吗?你说的好像不是一回事!
世界上只有一种真正的英雄主义,那就是看清生活的真相之后,依然热爱生活。
3楼2013-08-12 10:48:38
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reninhat

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
根据公式算出的1ml中的细胞数,那么10000倍就是测量格体积与1ml的比例
4楼2013-08-12 12:43:32
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