应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 有谁用过碧云天的一抗二抗洗脱液吗？
51/1返回列表
查看: 8203  |  回复: 10
只看楼主@他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

herjasmine

新虫 (初入文坛)

[求助] 有谁用过碧云天的一抗二抗洗脱液吗？

之前买洗脱液的老师找不到说明书了。这个洗脱液我用过一次，当时手动摇了3分钟左右吧，Marker颜色就变的很淡了。因为担心把蛋白洗掉就没有继续stripping了。后来做总蛋白的，还是有条带出来，位置和Stripping前做的磷酸化的蛋白位置一致。但我总担心这个条带会不会有stripping不好而有些部分仍然是磷酸化的可能，因为位置相同我也不好判断。就做过这一次stripping的。有用过碧云天的一抗二抗洗脱液的同仁们给点建议吗？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼2013-08-02 17:14:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

永峰1230

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-08-03 00:30:06
我没用过你说的，我是用自己配的stripping buffer。如果你指prestained的marker条带颜色变浅，这很正常。prestained marker的蛋白上结合了染料，stripping可以破坏染料与蛋白的结合，但蛋白应该还在膜上。当然，这要 ...

请问，，你的 stripping buffer  是 TBST 吗
赞一下 回复此楼
12
7楼2014-03-28 08:43:26
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
herjasmine(gyesang代发): 金币+2, 鼓励回帖应助！ 2013-08-03 14:03:54
我没用过你说的，我是用自己配的stripping buffer。如果你指prestained的marker条带颜色变浅，这很正常。prestained marker的蛋白上结合了染料，stripping可以破坏染料与蛋白的结合，但蛋白应该还在膜上。当然，这要看stripping buffer和strip条件，如果太harsh，可能会把部分蛋白从膜上strip下来。
赞一下 回复此楼
2楼2013-08-03 00:30:06
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

herjasmine

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-08-03 00:30:06
我没用过你说的，我是用自己配的stripping buffer。如果你指prestained的marker条带颜色变浅，这很正常。prestained marker的蛋白上结合了染料，stripping可以破坏染料与蛋白的结合，但蛋白应该还在膜上。当然，这要 ...

谢谢你！想再问一下：1、如果marker不太清楚了，还要继续Stripping吗？因为没有什么好的参照来判断我的蛋白会不会被洗掉了呀。2、stripping的时间比较短我又担心之前磷酸化的一抗二抗会不会残留在上面了，从而造成后面Total的假阳性结果。会有这种情况吗？3、我之前做的total的是在Stripping5分钟左右看见marker颜色变淡后停止操作的，后面封闭、孵一抗、二抗的等步骤应该没有问题，那我后来做出来的TOTAL的条带可信吗？
赞一下 回复此楼
3楼2013-08-03 20:12:16
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

herjasmine

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by herjasmine at 2013-08-03 20:12:16
谢谢你！想再问一下：1、如果marker不太清楚了，还要继续Stripping吗？因为没有什么好的参照来判断我的蛋白会不会被洗掉了呀。2、stripping的时间比较短我又担心之前磷酸化的一抗二抗会不会残留在上面了，从而造成 ...

打错了，是stripping3分钟左右。
赞一下 回复此楼
4楼2013-08-03 20:15:03
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 SCI英文润色翻译-EnPapers美团队-先修改后付款
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 博士后创新人才支持计划公示 +8 aishida144 2024-06-14 11/550 2024-06-14 15:34 by msjy
[找工作] 江西双非一本和四川双一流高校如何选择？ 5+6 寒山敲钟 2024-06-12 18/900 2024-06-14 12:49 by GavinKing
[基金申请] 博后面上今天有bug可以看到是否资助？ +19 lyfbangong 2024-06-12 30/1500 2024-06-14 12:30 by Yanchong
[基金申请] 有没有机械的前辈分享一下评上海优都是什么成果啊 +6 wulala800 2024-06-10 6/300 2024-06-14 11:19 by kyois8782
[基金申请] 化学会年会改成一年开一次了？ +5 babu2015 2024-06-12 13/650 2024-06-14 10:46 by babu2015
[基金申请] 75批博后基金 +10 kyukitu 2024-06-13 13/650 2024-06-14 10:31 by kyukitu
[基金申请] 博士后基金需要结题吗？ +7 zhouchuck 2024-06-13 7/350 2024-06-14 10:23 by zt0543
[论文投稿] 返修送审后第3天，只有原来的一个审稿人接受了审稿，其他两个有没有可能跑路？ 60+5 huanpo116 2024-06-08 9/450 2024-06-14 10:01 by bobvan
[考博] 还能读上博士吗 +14 小伙走起 2024-06-09 24/1200 2024-06-14 06:32 by 18787065176
[硕博家园] 硕博巨婴，也许才刚刚开始 +22 SNaiL1995 2024-06-12 52/2600 2024-06-14 04:36 by SNaiL1995
[基金申请] 什么时候会评呢？ +8 qq632458 2024-06-07 10/500 2024-06-14 00:58 by wangting_nju
[食品] 食品博士导师 +5 小李醒yy 2024-06-11 7/350 2024-06-13 22:37 by 小李醒yy
[硕博家园] 科研求助 +5 杲www 2024-06-12 6/300 2024-06-13 16:16 by 姓李名明
[博后之家] 第75批博后面上大概什么时候能出结果。 +4 超级老快 2024-06-07 5/250 2024-06-13 15:53 by 三号背心
[基金申请] 中者为王-观某校级项目为领导瓜分有感 +24 zqwcr 2024-06-08 36/1800 2024-06-13 14:53 by yuting
[教师之家] 副教授跳槽 +24 �徐凤年 2024-06-07 26/1300 2024-06-13 08:36 by Fanninger
[硕博家园] 申博 +3 悦悦小小鱼 2024-06-12 3/150 2024-06-12 15:11 by chen5805
[硕博家园] 求助 +6 LYWwrz 2024-06-09 9/450 2024-06-11 13:12 by powerhours
[论文投稿] 审稿交流 +5 huyugan123 2024-06-08 7/350 2024-06-10 10:51 by huyugan123
[考博] 希望能25博士入学，可提前一年做科研助理 +3 干饭版小太阳 2024-06-09 7/350 2024-06-10 00:05 by 干饭版小太阳
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭