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有谁用过碧云天的一抗二抗洗脱液吗？
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| 之前买洗脱液的老师找不到说明书了。这个洗脱液我用过一次，当时手动摇了3分钟左右吧，Marker颜色就变的很淡了。因为担心把蛋白洗掉就没有继续stripping了。后来做总蛋白的，还是有条带出来，位置和Stripping前做的磷酸化的蛋白位置一致。但我总担心这个条带会不会有stripping不好而有些部分仍然是磷酸化的可能，因为位置相同我也不好判断。就做过这一次stripping的。有用过碧云天的一抗二抗洗脱液的同仁们给点建议吗？ |
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strip不充分的确会造成一抗残留而影响western的结果。为了检测strip的效果，你可以把strip的膜不孵育一抗，其它按照western步骤来，看看是否有一抗残留。 至于strip过的问题，当然是有可能的。一般情况下，抗原与膜的结合能力是比与抗体结合的强的。strip一般是通过改变pH或者其它条件破坏抗体与抗原的可逆结合。但是，很难说是否有抗原从膜上掉下来，也很难检测。 |
6楼2013-08-06 22:53:44
永峰1230
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