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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 大家说说大肠杆菌表达菌株一般最大能表达多少kd的蛋白质？
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bleach060452

新虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-08-14 17:34:23
引用回帖:
7楼: Originally posted by 易水寒明 at 2013-08-14 15:16:49
那该怎么办啊？我质粒都构建了好久了，还没有连接上...

具体还是得看你的蛋白和实验目的，大肠杆菌表达挺不靠谱的，凡是结构复杂、分子量过大、修饰多的蛋白都很麻烦，无论是表达量还是活性。

看到你说做体外激酶活性，不太了解，但估计需要活性和表达量兼得。那么对于E.coli可以尝试，但估计意义不大，还浪费大量时间、成本；考虑一下其他表达系统吧。

个人简介，仅供参考
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岂能尽如人意，但求无愧我心
11楼2013-08-14 17:10:46
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929519755

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
10楼: Originally posted by 易水寒明 at 2013-08-14 15:19:00
那请问用哺乳动物细胞表达，用免疫沉淀纯化行不行啊？我用来做体外激酶反应测试的。...

我不懂哺乳动物细胞表达。关键你的那个蛋白太大，不然可以尝试酵母表达￥……
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想你没话说
12楼2013-08-15 11:07:54
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易水寒明

银虫 (小有名气)
引用回帖:
12楼: Originally posted by 929519755 at 2013-08-15 11:07:54
我不懂哺乳动物细胞表达。关键你的那个蛋白太大，不然可以尝试酵母表达￥……...

酵母表达太麻烦，而且不熟悉。
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13楼2013-08-15 18:51:46
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