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易水寒明

银虫 (小有名气)

[交流] 大家说说大肠杆菌表达菌株一般最大能表达多少kd的蛋白质?已有5人参与

大家说说大肠杆菌表达菌株一般最大能表达多少kd的蛋白质?我要表达的蛋白质大概180kd,基因片段4000bp左右,能表达出有活性的蛋白吗?求解
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bleach060452

新虫 (小有名气)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2013-08-14 17:34:23
引用回帖:
7楼: Originally posted by 易水寒明 at 2013-08-14 15:16:49
那该怎么办啊?我质粒都构建了好久了,还没有连接上...

具体还是得看你的蛋白和实验目的,大肠杆菌表达挺不靠谱的,凡是结构复杂、分子量过大、修饰多的蛋白都很麻烦,无论是表达量还是活性。

看到你说做体外激酶活性,不太了解,但估计需要活性和表达量兼得。那么对于E.coli可以尝试,但估计意义不大,还浪费大量时间、成本;考虑一下其他表达系统吧。

个人简介,仅供参考
岂能尽如人意,但求无愧我心
11楼2013-08-14 17:10:46
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bleach060452

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
都180了,表达都玄乎,还想有活性,你太贪心了
岂能尽如人意,但求无愧我心
2楼2013-08-02 17:03:53
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547star

木虫 (著名写手)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
amisking: 金币+1, 鼓励发帖交流! 2013-08-02 21:54:38
做了才知道。蛋白质越大越容易得到有活性的蛋白,只是表达量可能不高。
为什么
3楼2013-08-02 20:28:34
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Sthunder

木虫 (正式写手)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2013-08-14 17:33:45
主要取决于蛋白性质,180还是有可能表达的,Good luck!
互助互励,共奋共进!!
4楼2013-08-02 22:33:30
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