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Ryan2011

铜虫 (正式写手)

[求助] 【液相色谱】纯物质怎么出现双峰呢???求大神解答啊。。。。!!!

首先感谢!!!!感谢各位看帖!!

再次进入主题了。。。。如下。。

色谱柱:Wondsail C18-WR, 保护住 也是Wondsail C18

测试条件:流动相甲醇:水=70:30,流速0.8ml/min,检测波长326nm,测试物质 对硝基酚p-NP

我给出的是在上述条件下测试的同一个峰图,前面一个是放大的,可以明显看出有一个小峰在主峰右边。。。。

问题:

1、这个小峰是怎么出现的呢?能改善吗?可以从哪几个方面入手呢?

2、这个小峰,相对强度不大可以忽略么?这样的条件能用来做标准曲线吗?

3、如果知道的高手,顺便也告诉我下主峰左边那个一凸一凹的峰是什么东西,以前我测一些物质的时候也有


感激不尽~~~








【液相色谱】纯物质怎么出现双峰呢???求大神解答啊。。。。!!!
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【液相色谱】纯物质怎么出现双峰呢???求大神解答啊。。。。!!!-1
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Ryan2011

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by zxwcn at 2013-08-01 10:34:30
1.空白是配样品的溶剂
2.出峰太快,样品中各个组分不一定分的开,会直接影响定量。
3.增加流动相中水的比例,降低流速,更换长柱子,降低柱温等等。...

多谢您的指导~~以下我的回复略显冗长。。。。目的也是出于想让您跟了解情况,以便好回答。。。。望谅解~~

第一、回复您上一回合问题
   1、我进了配【对硝基酚】溶液用的超纯水,果然是水的峰
   2、针对我测的对硝基酚这种物质,溶剂的峰相对主峰强度小了很多,而且两个峰不是连在一起,分开的的还算可以接收,所以我打算也不改变条件了,就直接在当下条件下使用了

第二、再有新的问题。。。(本来想发新帖,但觉得内容又差不多,就在此再问问您了,多谢啊~~~~~~~~~)【【【路过的知情的朋友也不要吝啬各抒己见啊~~~~~!!!!】】】
    1、我测的另外一种物质【双酚A|双酚基丙烷|BPA,280nm,甲醇:H2O=75:25】也有超纯水的峰,但是溶剂峰相对主峰比较强,如果测比较低浓度的话就不好忽略了。更主要的是,溶剂的峰和主峰重合了,分离的不好。
    2、我按您给的建议,改变了流动相水的比例,降低了流速,但是还是无法得到理想的峰形状。我上传几张图给您看看:

图1是:75:25=甲醇:水(我之前有一根柱子就是这个比例能比较好的出峰,是图8)

图2是:单独的溶剂峰

图3是:60:40=甲醇:水

图4是:70:30=甲醇:水

图5是:图4的放大(可以看到溶剂峰和主峰连在一起了,而且相对强度比较高)

图6是:图1的放大(同样可以看到溶剂峰和主峰连在一起。。。而且比较大)

图7是:这是我用原来的柱子在75:25的条件下测的非常低浓度5ppm的【双酚  A】,左边纵坐标的强度可以看出,这里基本没有溶剂峰的干扰,溶剂峰很小,其他条件都一模一样,只是之前用的wondsail-C18,而现在用的是wondsail-C18-WR,也就是宽pH范围的,按道理来说,性能还要好些,就不理解为什么同样条件下,差别这么大。。。。

图8是:80:20=甲醇:水


现在总得来说,我就是希望能把溶剂峰的强度降低,并且和主峰区分开来,不重合,从而不影响峰的识别。您觉得还可以怎样处理呢???(如果我的想法不对或不现实,烦请您指出~~~~)

再次言谢!!!!恭候回复~~
【液相色谱】纯物质怎么出现双峰呢???求大神解答啊。。。。!!!-2
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14楼2013-08-02 23:49:30
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zxwcn

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
Ryan2011: 金币+1, 有帮助, 多谢交流指导~~~~ 2013-08-01 10:27:10
楼主走空白了吗,你说的这些峰可能都是是空白里的。而且需要改变下方法啊,出峰有点早,略有拖尾。
2楼2013-08-01 09:16:37
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e_liang369

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
Ryan2011: 金币+1, 有帮助, 多谢交流指导~~~~ 2013-08-01 10:27:01
空白走稳后再进你的样品,出峰时间太早,所以说前后两峰都不好跟你判断是样品是干扰
悲催的研发!
3楼2013-08-01 09:42:33
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Ryan2011

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zxwcn at 2013-08-01 09:16:37
楼主走空白了吗,你说的这些峰可能都是是空白里的。而且需要改变下方法啊,出峰有点早,略有拖尾。

~感谢的回帖指导~~~
我想追问下:
1\这里的空白是指我用来配样品溶液的溶剂呢,还是流动相啊?(我用超纯水配的呢)
2、你提到的出峰时间有点早是个问题?(我不是特别理解额,为什么出峰时间早不好呢,节省时间啊)
3、您提到的需要改变方法,可以从哪几个方面入手呢?可否给我提供几条
可以尝试的方法啊,多谢多谢!!!
4楼2013-08-01 10:24:01
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