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辛琪

铜虫 (小有名气)

[求助] 测定昆虫体内多功能氧化酶的时候,以对硝基苯酚制作标准曲线,应该怎么做呢?

测定昆虫体内多功能氧化酶的时候,以对硝基苯酚制作标准曲线,应该怎么做呢?如何配制,配制多大的浓度呢
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未来,我来
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ckgzp

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 辛琪 at 2013-08-02 14:59:47
谢谢你的耐心回答,还想再问你一下,测酯酶活性时,用a-乙酸萘酯做标准曲线该怎么做呢?...

你指的是羧酸酯酶吧!这个酶活测定原理是α-乙酸萘酯在酶液的催化下生产α-萘酚,然后显色剂显色,用分光光度计测定。所以要做的是α-萘酚的标曲。分别取0.1 mmol/L α-萘酚0、0.3、0.6、1.2、1.5、2.4和3.0 mL,在分别加入0.04 mol/L pH7.0磷酸缓冲液9.0、8.7、8.4、7.8、7.5、6.6和6.0 mL,然后各加入1mL显色剂,混匀,室温静置30 min,600 nm下测OD值。(显色剂为:1 %固蓝B盐溶液(0.10 g固蓝B盐溶解在10 mL 5 %的HCl中)和5 %十二烷基硫酸钠溶液(5.00 g十二烷基硫酸钠溶解在100 mL双蒸水中)以2:5(V:V)的比例混合,现配现用。)

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开心每一天,奋斗每一天!
4楼2013-08-03 20:44:53
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ckgzp

金虫 (初入文坛)

辛琪: 回帖置顶 2013-08-02 14:55:55
像试管中分别加入0.1 mmol/L对硝基苯酚0、0.2、0.4、0.8、1.2、1.6和2.0 mL然后分别加入 0.5 mol/L NaOH溶液至5mL(获得0.008、0.016 、0.032 、0.048 、0.064和0.080mmol/L留个浓度对硝基苯酚)混匀,室温放置30 min,405 nm比色,即可获得浓度-OD值标曲 。

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开心每一天,奋斗每一天!
2楼2013-07-30 22:20:44
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辛琪

铜虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by ckgzp at 2013-07-30 22:20:44
像试管中分别加入0.1 mmol/L对硝基苯酚0、0.2、0.4、0.8、1.2、1.6和2.0 mL然后分别加入 0.5 mol/L NaOH溶液至5mL(获得0.008、0.016 、0.032 、0.048 、0.064和0.080mmol/L留个浓度对硝基苯酚)混匀,室温放置30 m ...

谢谢你的耐心回答,还想再问你一下,测酯酶活性时,用a-乙酸萘酯做标准曲线该怎么做呢?
未来,我来
3楼2013-08-02 14:59:47
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354427392

银虫 (小有名气)

请问楼主多功能氧化酶如何得来的
我想做一个有意思的人
5楼2013-08-03 23:00:25
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