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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » Sartorius 超滤管总是被堵
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sepuzhu

新虫 (初入文坛)

[求助] Sartorius 超滤管总是被堵

最近在用10k Da超滤管做FASP实验时，总是发现超滤管中溶液无法离心干净，超滤前样品已高速离心去杂质，同时也测了样品浓度（小于20ug），求各位大神可以告知到底是什么原因造成的呢？感激不尽
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1楼 2013-07-28 22:56:16
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江南

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
silicare: 金币+2, 谢谢参与 2013-08-01 10:49:58
我一般做FASP上10k的时候都会先过一遍0.22um的超滤管，高速离心是多少转？我觉得可能是残留的脂类物质，实在不行考虑一下30k的也可以的
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2楼2013-07-29 12:06:44
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256k

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
silicare: 金币+3, BioEPI+1, 谢谢参与 2013-08-01 10:50:17
用滤纸或者0.45um的先粗滤一下，试试是否有效过。如果无效，可能你的东西分子量太大，聚集在膜上，堵住了
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3楼2013-07-31 11:12:00
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sepuzhu

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 江南 at 2013-07-29 12:06:44
我一般做FASP上10k的时候都会先过一遍0.22um的超滤管，高速离心是多少转？我觉得可能是残留的脂类物质，实在不行考虑一下30k的也可以的

所用高速离心是20000转~你是将样品加入至0.22um的超滤管么？会有一定的损失吧？
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4楼2013-07-31 17:20:01
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sepuzhu

新虫 (初入文坛)
silicare: 针头滤器即可 2013-08-01 10:51:04
引用回帖:
3楼: Originally posted by 256k at 2013-07-31 11:12:00
用滤纸或者0.45um的先粗滤一下，试试是否有效过。如果无效，可能你的东西分子量太大，聚集在膜上，堵住了

主要怕样品会吸附在滤纸上，至于分子量过大的问题，就不太清楚了
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5楼2013-07-31 18:50:50
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江南

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by sepuzhu at 2013-07-31 17:20:01
所用高速离心是20000转~你是将样品加入至0.22um的超滤管么？会有一定的损失吧？...

不会的，用的1.5mL规格的0.22um超滤管，一般没什么损失
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6楼2013-08-01 12:38:37
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