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sepuzhu

新虫 (初入文坛)

[求助] Sartorius 超滤管总是被堵

最近在用10k Da超滤管做FASP实验时,总是发现超滤管中溶液无法离心干净,超滤前样品已高速离心去杂质,同时也测了样品浓度(小于20ug),求各位大神可以告知到底是什么原因造成的呢?感激不尽
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江南

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
silicare: 金币+2, 谢谢参与 2013-08-01 10:49:58
我一般做FASP上10k的时候都会先过一遍0.22um的超滤管,高速离心是多少转?我觉得可能是残留的脂类物质,实在不行考虑一下30k的也可以的
2楼2013-07-29 12:06:44
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256k

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
silicare: 金币+3, BioEPI+1, 谢谢参与 2013-08-01 10:50:17
用滤纸或者0.45um的先粗滤一下,试试是否有效过。如果无效,可能你的东西分子量太大,聚集在膜上,堵住了
3楼2013-07-31 11:12:00
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sepuzhu

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 江南 at 2013-07-29 12:06:44
我一般做FASP上10k的时候都会先过一遍0.22um的超滤管,高速离心是多少转?我觉得可能是残留的脂类物质,实在不行考虑一下30k的也可以的

所用高速离心是20000转~你是将样品加入至0.22um的超滤管么?会有一定的损失吧?
4楼2013-07-31 17:20:01
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sepuzhu

新虫 (初入文坛)

silicare: 针头滤器即可 2013-08-01 10:51:04
引用回帖:
3楼: Originally posted by 256k at 2013-07-31 11:12:00
用滤纸或者0.45um的先粗滤一下,试试是否有效过。如果无效,可能你的东西分子量太大,聚集在膜上,堵住了

主要怕样品会吸附在滤纸上,至于分子量过大的问题,就不太清楚了
5楼2013-07-31 18:50:50
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江南

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by sepuzhu at 2013-07-31 17:20:01
所用高速离心是20000转~你是将样品加入至0.22um的超滤管么?会有一定的损失吧?...

不会的,用的1.5mL规格的0.22um超滤管,一般没什么损失
6楼2013-08-01 12:38:37
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