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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 新药研发 » 质量控制 » 色谱柱的选择，水相调pH置7.9，是否可以选用pH范围2-9的色谱柱？
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flycpu

新虫 (小有名气)

[交流] 色谱柱的选择，水相调pH置7.9，是否可以选用pH范围2-9的色谱柱？

水相调pH置7.9，水相：有机相=65：35，整体pH7.5左右，先选用一根pH2-9的色谱住，分离效果均较好，但是连续实验3-5天，柱效会有所下降，冲一冲也就好了，可以继续做下去吗？
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1楼 2013-07-27 18:59:40
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haill005

金虫 (正式写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
flycpu: 金币+1 2013-07-29 12:38:18
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2?: Originally posted by yurong1000 at 2013-07-27 22:25:51
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你好，想请教一下，水相比例具体是怎么规定的？我们平常实验都用到 70：30 了阿

[ ????С??????? ]
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5楼2013-07-28 08:51:53
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yurong1000

至尊木虫 (著名写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
flycpu(zhychen2008代发): 金币+1, 多谢参与 2013-07-27 23:58:41
可以是可以，就是你的水相的比例有点太高了，如果用的有机相是乙腈，建议换成甲醇试试
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2楼2013-07-27 22:25:51
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cpu40

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
2楼: Originally posted by yurong1000 at 2013-07-27 22:25:51
可以是可以，就是你的水相的比例有点太高了，如果用的有机相是乙腈，建议换成甲醇试试

65%的水相还高？？？
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4楼2013-07-28 08:48:56
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News

专家顾问 (职业作家)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
flycpu: 金币+1 2013-07-29 12:38:36
可能在混合后流动相的pH发生了些许改变，例如上升，
两个方法：1、加大缓冲液浓度，提高缓冲液的缓冲能力，不过一般缓冲盐的浓度不会超过50mmmol，超过了稳定性和重现性不太好----书籍，我自己还没试过。
          2.买根pH范围宽的色谱柱，Agilent 的ZORBAX Extend-c18/8系列的范围很宽  2~11.5   
另外，色谱柱的正常使用与维护对于色谱柱的寿命十分重要。
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7楼2013-07-28 13:42:12
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