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duke188

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
18楼: Originally posted by hexia313 at 2013-07-28 08:15:42
转膜时间太短了

有点可能

[ 发自小木虫客户端 ]
21楼2013-07-28 18:49:21
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duke188

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
16楼: Originally posted by shishun2008 at 2013-07-27 14:27:15
应该是电极反了

绝对没反,还是有条带的

[ 发自小木虫客户端 ]
22楼2013-07-28 18:49:55
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wilian8

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
转膜时间短了,我的目的蛋白170KD,250mA,要转2h以上。还有可能是转膜液的问题.
23楼2013-07-29 12:27:44
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cy426312

铜虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我50KD的蛋白,转了3.5H。。。应该是时间太短
24楼2013-07-29 15:10:45
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ericyo918

至尊木虫 (知名作家)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
大蛋白和小蛋白的转膜速率是不一样的,有可能电流过大,转穿了,你可以减少小转膜时间或者电流。
下次可以在膜下面再加一个膜,看看有marker转到下面的膜上不
25楼2013-07-29 15:40:26
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xiaoxiang5

银虫 (正式写手)

引用回帖:
20楼: Originally posted by duke188 at 2013-07-28 18:49:08
不是要全部浸泡么
...

难怪啊
你少加点水,把滤纸和膜基本润湿就可以了
26楼2013-07-29 22:23:20
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厦大生物杨超

铜虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
如果正负极没查错 也许是transfer buffer的问题 你可以问下其他人的实验结果 或者把sample给别人 让别人帮你跑一下就知道是不是你操作有问题了~
Nosweetwithoutsweat!
27楼2013-07-29 23:11:10
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lugylucy

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
20楼: Originally posted by duke188 at 2013-07-28 18:49:08
不是要全部浸泡么
...

我在丁香园里问过,建议是transfer buffer尽量加满。
28楼2013-08-02 20:49:37
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lugylucy

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
23楼: Originally posted by wilian8 at 2013-07-29 12:27:44
转膜时间短了,我的目的蛋白170KD,250mA,要转2h以上。还有可能是转膜液的问题.

你好,我的目的蛋白是180-190kDa,正在摸湿转的条件。如果300mA3h,你觉得怎么样?如果400mA 4h会不会存在转过的问题?谢谢!!!
29楼2013-08-02 20:52:10
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929519755

金虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你的膜的孔径是多少?孔径过大的话,小分子量蛋白有可能穿过膜。建议你转膜时间短一点
想你没话说
30楼2013-08-03 07:56:02
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