6楼: Originally posted by gyesang at 2013-07-26 12:54:39
的确如二楼所说，质粒太大了，然后又浓度太低，你可以做个中抽然后送测序，不知道你用的是什么cosmid载体？

2楼: Originally posted by longrna at 2013-07-26 10:50:54
首先你说上下游引物双向测序是要分开的呵，上下游引物不能混一起，要单独。
根据你的情况，问题应该在于你的质粒太小，浓度太低。所以导致测序没信号。
要找有经验的测序公司，跟他们技术沟通。提取高浓度的质粒。

2楼: Originally posted by longrna at 2013-07-26 10:50:54
首先你说上下游引物双向测序是要分开的呵，上下游引物不能混一起，要单独。
根据你的情况，问题应该在于你的质粒太小，浓度太低。所以导致测序没信号。
要找有经验的测序公司，跟他们技术沟通。提取高浓度的质粒。