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除了转基因,还有其他方法进行功能鉴定么?
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各位好,本人从事作物分子遗传。目前通过fine mapping分离出一single显性candidate gene,但该作物遗传转化非常非常难,即使做了也不知道什么时候能做出来,也未见报道,本实验室构建的体系也不成熟。 所以,本人想通过其他途径看看能否实现(亲本A, 亲本B)。 1. 本人在fine mapping所用到的两个离target gene最近的交换株(比如H-H-B和B-H-H),将这两个交换株(或者后代)杂交,在后代F2中会出现B-A(target gene)-B后代,如果经表型鉴定符合预期结果的话,能否证明该基因引起此表型?能否可以代替转基因?因为即使转基因的话我也是将B亲本中的target gene RNAi, 和这个BAB是一样的效果,只不过BAB材料背景可能没有A line那么纯。 2. 老板建议用我现有群体的交换株X和Aline再进行杂交,进而得到分离群体,然后再用gene specific marker 去鉴定,如果基因型表型符合,说明该基因确实具有功能。我觉得这样做和之前做的cross 一个效果,他说这个两个不同的story,请问,这样可行么?有意义么? 是否还有其他方法可以验证功能。请各位多多赐教。 |
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