应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » GFP定位
81/1返回列表
查看: 2899  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

小猫三两只

金虫 (正式写手)

[求助] GFP定位

做植物亚细胞定位，构建载体时，目的基因插入在GFP前面，基因的终止密码子应该去掉，那么GFP的起始密码子用不用去掉呀？我的基因和GFP中间有载体上的序列，刚好翻译成十个氨基酸，这样对定位有影响没？
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

核酸方面

» 猜你喜欢
1楼 2013-07-22 11:31:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hyphen007

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币-1, 违规存档, 如果不是应助的话请不要点击应助按钮，分子生物期待你的更多精彩谢谢理解 2013-07-24 17:03:52
帮楼主顶起，坐等学习
赞一下 回复此楼
2楼2013-07-22 11:33:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangqi1107

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小猫三两只(gyesang代发): 金币+2, 鼓励回帖应助！ 2013-07-22 19:05:30
载体图谱，连好GFP的大概图谱发过来看看，翻译这几个氨基酸是哪些氨基酸，一般目的基因序列接着就是GFP，中间会有酶切位点的序列，没有载体的序列。不知道你的怎么回事？
赞一下 回复此楼
3楼2013-07-22 17:40:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xz2001199802

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
GFP是载体本身的吧，你只需要把无终止子的目的基因转进去就好了，与GFP之间有片段没关系
赞一下(1人) 回复此楼
越学越无知
4楼2013-07-22 19:50:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西瓜

荣誉版主 (知名作家)
★ ★
amisking: 金币+2, 鼓励发帖交流！ 2013-07-22 20:28:30
GFP的起始密码子去不去都可以，我也两种都弄过，都可以用。关键是连在GFP前面的基因终止密码子，去掉就好了，还有就是克隆时别带进新的终止密码子。
另外还要小心读码框，保证连接后外源基因和GFP之间多余的碱基是3的倍数，不然会造成GFP的移码。
赞一下(2人) 回复此楼
5楼2013-07-22 20:18:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

oylb

禁言 (正式写手)
本帖内容被屏蔽
6楼2013-07-22 20:27:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xz2001199802

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by oylb at 2013-07-22 13:27:25
我们的经验，GFP前去掉ATG最好，因为会有低水平的细胞质荧光定位；但是去掉ATG很费力，有则最好，专门为了一个去做就不太值得。GFP与特定蛋白之间的MCS会有一些氨基酸产生，但是设计载体的时候前人也考虑到了这些， ...

如果怕ATG影响，可以用空载体转化作为一个对照
赞一下 回复此楼
越学越无知
7楼2013-07-22 20:32:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

oylb

禁言 (正式写手)
本帖内容被屏蔽
8楼2013-07-22 21:09:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 小猫三两只 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 jCd0dEvKHShX 2026-08-29 5/250 2026-08-30 19:23 by hZiFeudZyoGR
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 G6APbkg8SA6w 2026-08-29 4/200 2026-08-30 18:53 by hZiFeudZyoGR
[考博] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 6/300 2026-08-30 18:20 by hZiFeudZyoGR
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +7 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 10/500 2026-08-30 17:33 by hZiFeudZyoGR
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +6 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 7/350 2026-08-30 17:14 by hZiFeudZyoGR
[考博] 找导师 +6 yuanjiabao 2026-08-29 7/350 2026-08-30 14:40 by 生科新手
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 jCd0dEvKHShX 2026-08-29 5/250 2026-08-30 14:03 by GkCVyODlx4mR
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 8/400 2026-08-30 12:03 by l0VvVHGBGRLv
[考博] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 6/300 2026-08-30 11:10 by l0VvVHGBGRLv
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已，这评审意见是按照杰青的条件评的吧？ +6 gouxfjh 2026-08-28 11/550 2026-08-30 07:57 by gouxfjh
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 7/350 2026-08-30 06:10 by ZPa0EcMwuECS
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
[基金申请] 基金不中，共勉 +11 eulota 2026-08-26 11/550 2026-08-28 14:22 by 火星超人xi
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 哪位高人中了，把查询到的截图贴出来让我看看，让我长长见识 +5 yuleib84 2026-08-26 6/300 2026-08-28 00:02 by yudaoqian88
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件，有关系吗？ +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 出来了 +9 trojank 2026-08-26 9/450 2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
[基金申请] 明天应该可查了！？ +6 chengyan1220 2026-08-23 6/300 2026-08-25 19:45 by zfd97
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +9 图啦图啦 2026-08-24 10/500 2026-08-25 11:59 by 南海小哥
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭