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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 求助转化
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花小树

[交流] 求助转化

求助大家一下啊，给出个主意，
我用pmd19-T做连接，转感受态细胞，铺平板，但是长出来的菌落一直不多200左右，请教做过有经验的同学出出主意吧
恭谢大家了
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1楼 2007-11-01 21:12:52
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Airare

金虫 (正式写手)

虫游天下
做过，长出几十个，可是经IPTG、X－GAL筛选，却没有蓝斑，我想有阳性克隆就好了吧。
赞一下 回复此楼
——穿越死亡之门，到我这里来，虽则梦想褪色，岁月集成的果实腐烂掉，但我是永恒的真理，你将再会见我，在你从此岸渡向彼岸的生命航程中...
6楼2007-11-09 14:57:27
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telomerase

至尊木虫 (著名写手)

cain
估计是感受态不好！！
换一个试试，或做批新的用
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我的路靠我的脚踩出来！！！不走寻常路！！！
2楼2007-11-01 21:31:49
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zhouyj

木虫 (正式写手)
★
johnsooh(金币+1,VIP+0):thx
楼主如果用ligase酶连接，可以尝试常温（24度）连接，因为温度高了分子运动速度加快，碰撞机会增多，有益于连接，我曾经这样尝试过效果很好，我一直这样做的。如果用宝生物的solution I就16度1小时效果就很好
我觉得长出200多已经够多了
赞一下(10人) 回复此楼
有朋友们的支持，在学术道路上才不会寂寞
3楼2007-11-01 21:46:13
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fw1980613

银虫 (小有名气)
★
johnsooh(金币+1,VIP+0):thx
200个菌..........
以前我做转化，出几个就可以了，一半50%以上阳性。
后来感受态好了些出的菌也没你那么多啊。
菌多少无所谓，质量是关键，出1个就是是最佳理想
赞一下(10人) 回复此楼
4楼2007-11-09 13:37:43
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