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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 转基因 » 转基因后代检测
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zds2257

铁杆木虫 (小有名气)

[求助] 转基因后代检测

水稻转基因后代怎么PCR检测？
分离后代怎么确认它的阳性纯和？杂合？阴性纯和?
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1楼2013-07-21 09:22:12
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protura

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
zds2257: 金币+2 2013-07-25 14:47:27
有，但前提是你得知道转基因插入位点两端的分子特征信息，然后采用普通PCR的方法就可以鉴定纯合、杂合和阴性。
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4楼2013-07-24 16:55:44
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游侠892

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
zds2257: 金币+5 2013-07-23 10:11:58
下面的做法可以供参考：
一般每个株系取30株左右的DNA，如果30株均为阳性，则可以初步确定该株系为纯合株系；如果有分离则说明为杂合株系；如果全部没带，则说明为阴性纯合了。
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路漫漫其修远兮，吾将上下而求索
2楼2013-07-23 09:03:53
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zds2257

铁杆木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 游侠892 at 2013-07-23 09:03:53
下面的做法可以供参考：
一般每个株系取30株左右的DNA，如果30株均为阳性，则可以初步确定该株系为纯合株系；如果有分离则说明为杂合株系；如果全部没带，则说明为阴性纯合了。

哦  我们实验室是取20株检测的   我想问问有其它的方法吗？
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3楼2013-07-23 10:12:59
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zds2257

铁杆木虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by protura at 2013-07-24 16:55:44
有，但前提是你得知道转基因插入位点两端的分子特征信息，然后采用普通PCR的方法就可以鉴定纯合、杂合和阴性。

这要拉出它旁邻序列，好像不容易做
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5楼2013-07-25 14:45:35
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