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zds2257

铁杆木虫 (小有名气)

[求助] 转基因后代检测

水稻转基因后代怎么PCR检测?
分离后代怎么确认它的阳性纯和?杂合?阴性纯和?
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游侠892

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
zds2257: 金币+5 2013-07-23 10:11:58
下面的做法可以供参考:
一般每个株系取30株左右的DNA,如果30株均为阳性,则可以初步确定该株系为纯合株系;如果有分离则说明为杂合株系;如果全部没带,则说明为阴性纯合了。
路漫漫其修远兮,吾将上下而求索
2楼2013-07-23 09:03:53
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zds2257

铁杆木虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 游侠892 at 2013-07-23 09:03:53
下面的做法可以供参考:
一般每个株系取30株左右的DNA,如果30株均为阳性,则可以初步确定该株系为纯合株系;如果有分离则说明为杂合株系;如果全部没带,则说明为阴性纯合了。

哦  我们实验室是取20株检测的   我想问问有其它的方法吗?
3楼2013-07-23 10:12:59
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protura

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
zds2257: 金币+2 2013-07-25 14:47:27
有,但前提是你得知道转基因插入位点两端的分子特征信息,然后采用普通PCR的方法就可以鉴定纯合、杂合和阴性。
4楼2013-07-24 16:55:44
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zds2257

铁杆木虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by protura at 2013-07-24 16:55:44
有,但前提是你得知道转基因插入位点两端的分子特征信息,然后采用普通PCR的方法就可以鉴定纯合、杂合和阴性。

这要拉出它旁邻序列,好像不容易做
5楼2013-07-25 14:45:35
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Lau_Kimura

铁虫 (正式写手)

直接PCR它的报告基因。
6楼2014-01-31 22:49:35
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