应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR
202/2返回列表上一页12
查看: 1320  |  回复: 19
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

小瞎子

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
10楼: Originally posted by hyc_charles at 2013-07-22 18:31:35
你们实验室没有成像系统吗，建议你用成像系统拍照后，标注好marker和辅助线，我们才好帮你分析。因为看不清楚，只能看到最下端有些条带，看位置，估计是引物二聚体，貌似没什么条带

谢谢。嗯，最近我们那个仪器坏了，新的还没有买回来，所以只能用简易的自己照下来了。
赞一下 回复此楼
rover
11楼2013-07-22 19:12:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Sthunder

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
9楼: Originally posted by 小瞎子 at 2013-07-22 15:35:51
谢谢，那俩个是师姐毕业前提的，应该是吧。师姐说pcr后的目的条带大概是400bp，我应该也是。退火温度我们是55度。
94    5min
94    30s
55    30s
72   1min
72    10min
循环35次
4      无限
一般情 ...

大家好像都喜欢预变形 5min，个人觉得实在没必要，浪费时间而且损酶活（除非你的taq是热启动），一般用gDNA为模板 2min，质粒 1min，cDNA 40s足以！

用trizol的时候，不管是组织还是细胞，我从来不用显微镜检验，因为trizol已经很厉害了，而且如果你提取的样品是组织或者菌丝什么的，都是经过液氮研磨后再用trizol处理。跑胶的话1.5是没有问题的，只要能看到3条带，即使2条带的mRNA都可以用来反转录！good luck
赞一下 回复此楼
互助互励，共奋共进！！
12楼2013-07-23 00:35:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小瞎子

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
12楼: Originally posted by Sthunder at 2013-07-23 00:35:35
大家好像都喜欢预变形 5min，个人觉得实在没必要，浪费时间而且损酶活（除非你的taq是热启动），一般用gDNA为模板 2min，质粒 1min，cDNA 40s足以！

用trizol的时候，不管是组织还是细胞，我从来不用显微镜检验 ...

嗯，谢谢你的指点，今天准备再做一下，看看结果如何，
赞一下 回复此楼
rover
13楼2013-07-23 08:34:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小瞎子

金虫 (初入文坛)
内容已删除
回复此楼
rover
14楼2013-07-24 15:15:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小瞎子

金虫 (初入文坛)
非常感谢各位，我把这次提rna后，反转录，pcr后的电泳图给大家看看，貌似是提出来了。
赞一下 回复此楼
rover
15楼2013-07-24 15:20:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小瞎子

金虫 (初入文坛)
这个是图：
PCR
第三次细胞1.jpg
赞一下 回复此楼
rover
16楼2013-07-24 15:22:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小瞎子

金虫 (初入文坛)
不知道怎么传出来看不到图片，再试试
PCR-1
第三次细胞.jpg


PCR-2
第三次细胞1.jpg


PCR-3
第三次细胞2.jpg
赞一下 回复此楼
rover
17楼2013-07-24 15:24:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小瞎子

金虫 (初入文坛)
谢谢，不好意思
赞一下 回复此楼

» 本帖附件资源列表

  • 欢迎监督和反馈：小木虫仅提供交流平台，不对该内容负责。
    本内容由用户自主发布，如果其内容涉及到知识产权问题，其责任在于用户本人，如对版权有异议，请联系邮箱：xiaomuchong@tal.com
  • 附件 1 : 第三次细胞.jpg
    • 2013-07-24 15:26:38, 45.99 K
rover
18楼2013-07-24 15:26:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小瞎子

金虫 (初入文坛)
这次怎么没人回答我啊
赞一下 回复此楼
rover
19楼2013-07-26 09:03:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huayueyang

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

不要再用致癌物DEPC了，早该用其无毒替代品，外源RNA酶清除剂。
赞一下 回复此楼
坚持！
20楼2013-08-04 00:06:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 小瞎子 的主题更新
202/2返回列表上一页12
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭