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为何Western 目标条带亮度低
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kikiwitch
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为何Western 目标条带亮度低
已有2人参与
现在做一个蛋白,用的一抗是别人实验室给的,说1:10000 dilution就可以用。但是我们做出来的结果能看到目标条带,但亮度非常低。片子基本没有什么背景。二抗用的AP conjugated是1:30000.
是一抗浓度过低了吗?
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western blot 封完抗体,目标蛋白看不到,但是看家很好是怎么回事啊
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1楼
2013-07-11 18:19:55
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cicelyzh
铁杆木虫
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gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助!
2013-07-12 01:03:24
一抗稀释倍数与实验条件和检测方法有关,所以最佳稀释倍数在各个实验室会有些差异。你可以根据自己的条件参考建议稀释倍数自己调整。从你说的情况看可以适当减小稀释倍数。
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2楼
2013-07-12 00:10:21
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ljsh
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myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香。期待你的精彩和更详细的解答。
2013-07-12 08:37:11
一抗 1:1000
二抗 1:5000
试试
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2013-07-12 08:34:17
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kikiwitch
新虫
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专业: 生物大分子结构与功能
多谢各位。今天刚改了条件。回头来汇报!
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4楼
2013-07-12 18:55:32
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