应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 目的基因连T载体能连上，双酶切后连不上HTB质粒，都三个月了，纠结啊。。。
223/3返回列表上一页123
查看: 2184  |  回复: 21
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

zz418841988

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2013-07-21 08:14:56
hanyuem 说的对，你选的两个酶是同尾酶，同尾酶双酶切后做连接，载体就会自连成环，你的酶切后的载体自连的话应该会长满板的克隆，片段插入进去的概率就很小了，也就是说你的片段基本上就连不进去。如果你一定要用这两个酶的话，在载体双酶切后要去磷酸化处理，片段不用处理，再做连接，而且这样片段连进去后，还需要鉴定片段连接的方向。
赞一下 回复此楼
21楼2013-07-18 16:32:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaohaixie

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
13楼: Originally posted by hanyuem at 2013-07-17 17:11:17
我想问一下，你是怎么验证是否连接上的？...

连完以后菌液PCR、单双酶切验证、测序，我是这么做的
赞一下 回复此楼
Thehardyouwork,theluckyyouwill.年轻就要多吃苦
22楼2013-07-18 18:26:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 blueghost2 的主题更新
223/3返回列表上一页123
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭