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小精灵12

铁虫 (小有名气)

[求助] CAT酶活

有谁做过龙须菜CAT活性测定吗,为什么出现对照值小于样品值,请问这是怎么回事?紫外法测定
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rootsignal

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


stormxuhao: 金币+1, 积极回复 2013-08-03 10:45:37
我个人建议你测定的时候不要用煮死粗酶液作为对照,你若共3毫升反应体系,直接把粗酶液用PSB提取液代替作为对照,这样所有样品的对照是一样的。
你测定酶的活性,是单位时间内OD值的变化,其实和斜率有关,和你零点(对照)关系不大。
所以我的建议可以让你少做对照。
另外,样品在煮沸的过程中发生了变化,可能导致吸光值变小。我在实验中基本上不用煮死粗酶液,你自己推理,这个实验的方法有点问题。

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2楼2013-08-02 23:49:57
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小精灵12

铁虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by rootsignal at 2013-08-02 23:49:57
我个人建议你测定的时候不要用煮死粗酶液作为对照,你若共3毫升反应体系,直接把粗酶液用PSB提取液代替作为对照,这样所有样品的对照是一样的。
你测定酶的活性,是单位时间内OD值的变化,其实和斜率有关,和你零点 ...

谢谢回复,煮死酶液吸光值出现很大变化,后来在做就没再用此对照了
3楼2013-08-12 17:26:45
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