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小精灵12

铁虫 (小有名气)

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[求助] CAT酶活

有谁做过龙须菜CAT活性测定吗，为什么出现对照值小于样品值，请问这是怎么回事？紫外法测定

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浙江大学徐腾飞研究员招聘代谢组学、蛋白组学、生信、环境科学、模拟计算等背景博士后已经有2人回复

1楼 2013-07-10 13:42:32

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小精灵12

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引用回帖:

2楼: Originally posted by rootsignal at 2013-08-02 23:49:57
我个人建议你测定的时候不要用煮死粗酶液作为对照，你若共3毫升反应体系，直接把粗酶液用PSB提取液代替作为对照，这样所有样品的对照是一样的。
你测定酶的活性，是单位时间内OD值的变化，其实和斜率有关，和你零点 ...

谢谢回复，煮死酶液吸光值出现很大变化，后来在做就没再用此对照了

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3楼2013-08-12 17:26:45

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rootsignal

铁虫 (初入文坛)

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stormxuhao: 金币+1, 积极回复 2013-08-03 10:45:37

我个人建议你测定的时候不要用煮死粗酶液作为对照，你若共3毫升反应体系，直接把粗酶液用PSB提取液代替作为对照，这样所有样品的对照是一样的。
你测定酶的活性，是单位时间内OD值的变化，其实和斜率有关，和你零点（对照）关系不大。
所以我的建议可以让你少做对照。
另外，样品在煮沸的过程中发生了变化，可能导致吸光值变小。我在实验中基本上不用煮死粗酶液，你自己推理，这个实验的方法有点问题。

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小精灵12

2楼2013-08-02 23:49:57

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