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tanglian8655

金虫 (正式写手)

[求助] 无菌检测

小妹有一实验操作卡壳了,有点小问题想问问各位大侠

取金黄色葡萄球菌的新鲜培养物少许接种至营养肉汤培养基中。30-35℃培养18-24h,用0.9%无菌氯化钠制成每毫升含菌小于100菌落形成单位(cfu)的菌悬液。
请问这个菌悬液是怎么操作的啊
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神奇的名字

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

方法1:简单直接的方法就是10倍梯度稀释,即取1ml 已经培养18-24h的培养液于装有9ml的无菌试管中,标记为-1。混合均匀后吸取1ml 稀释液于另一只新的装有9ml的无菌试管中,标记为-2。以此类推,一直稀释到-8。对每个稀释度涂平板(3个平行),培养,计数就能得到你所需要的小于100菌落形成单位(cfu)的平板。
方法2:测OD值,一定的OD值稀释多少倍数后,能得到所需的菌悬液。这样做会对今后的工作带来便捷,如果只单纯的做一次,那么方法1是你的最佳选择。
9楼2013-07-12 11:56:18
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snqguang

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
做梯度稀释,涂板,计数,再确定哪个稀释度合适你的要求即可。
2楼2013-07-08 11:04:15
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老娘爱吃肉

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+3, 鼓励应助交流! 2013-07-08 14:51:16
亲,你这不叫无菌实验吧,要想配制成小于100cfu/ml的菌悬液,不能把金黄色葡萄球菌接种到营养肉汤液体培养基中,而是应先把金黄色葡萄球菌在营养琼脂板上活化一下啊,32°,24h就行了,然后拿一个6x10~8cfu/ml的麦氏比浊管作对照,用接种环挑取营养琼脂板上的金黄色葡萄球菌到0.9%无菌氯化钠(无菌的体积10ml)中,等到其浓度和比浊管的浓度相当时,可以认为金黄色葡萄球菌的浓度为6x10~8cfu/ml,然后逐级稀释到6x10cfu/ml就是你所需的菌悬液了
3楼2013-07-08 11:05:59
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tanglian8655

金虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 老娘爱吃肉 at 2013-07-08 11:05:59
亲,你这不叫无菌实验吧,要想配制成小于100cfu/ml的菌悬液,不能把金黄色葡萄球菌接种到营养肉汤液体培养基中,而是应先把金黄色葡萄球菌在营养琼脂板上活化一下啊,32°,24h就行了,然后拿一个6x10~8cfu/ml的麦氏 ...

药典上面就是在这么写的,请问亲是不是老手啊,请教!
4楼2013-07-08 11:19:45
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