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静唯尘

新虫 (小有名气)

[求助] 采用RP-HPLC测定有机酸,但始终无法分开乳酸和抗坏血酸,该怎么办呢?

采用RP-HPLC测定泡菜中有机酸,目前在用标准品溶液优化色谱条件,但无论条件怎么变,乳酸和抗坏血酸总是一点都分不开,完全是呈现一个峰的状态,该如何办呢?请各位高手给予指导,多谢!
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cl88887

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

有机酸柱Aminex HPX-87H分离有机酸效果很好,而且你分的这两个差这么多,但是没有柱子的话,可以试试用乙腈,乙腈的极性较甲醇小,可以试试,实在不行可以梯度洗脱,配个那个PBS,再配个3%甲醇的PBS,两个溶液进行梯度洗脱
9楼2013-10-17 16:56:46
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lifucheng

专家顾问 (知名作家)

楼主用的色谱条件是什么?

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
2楼2013-07-07 09:05:56
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静唯尘

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lifucheng at 2013-07-07 09:05:56
楼主用的色谱条件是什么?

3%甲醇:0.05mol/L磷酸二氢钾(pH2.5),0.8mL/min,25℃,210nm。已经试着调节流动相浓度,pH,以及甲醇添加量,流速和柱温,但它们始终都分不开。急死人了。
3楼2013-07-07 11:28:39
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xx小小xx

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
静唯尘: 金币+3 2013-07-07 14:54:26
不知道你用什么色谱柱,这类亲水性很强的有机酸,调整流动相的余地比较小,应该在色谱柱上改善
C18可能不太容易,用氰基柱应该会有改善,用离子交换色谱会比较适合
如果只有C18柱,可以试一下离子对色谱
4楼2013-07-07 13:17:53
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