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汕头大学海洋科学接受调剂
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静唯尘

新虫 (小有名气)

[求助] 采用RP-HPLC测定有机酸,但始终无法分开乳酸和抗坏血酸,该怎么办呢?

采用RP-HPLC测定泡菜中有机酸,目前在用标准品溶液优化色谱条件,但无论条件怎么变,乳酸和抗坏血酸总是一点都分不开,完全是呈现一个峰的状态,该如何办呢?请各位高手给予指导,多谢!
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xx小小xx

木虫 (著名写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 静唯尘 at 2013-07-07 14:54:08
实验室只有两根色谱柱,一根亲水性的C18,还有一根Kromasil C18,两根都试过,都分不开。又没有离子色谱,纠结。我看文献中有用C18做的,倒是分得开啊,不知道哪里出了问题。...

C18的种类也有很多,有些专门针对亲水性物质进行过优化,所以保留能力和选择性会比一般的C18要好一些

可以试一下C18柱做离子对分离模式,用季胺碱作为离子对试剂,加磷酸调整pH,不过详细条件的要摸索一下
8楼2013-07-08 21:07:39
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lifucheng

专家顾问 (知名作家)

楼主用的色谱条件是什么?

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
2楼2013-07-07 09:05:56
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静唯尘

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lifucheng at 2013-07-07 09:05:56
楼主用的色谱条件是什么?

3%甲醇:0.05mol/L磷酸二氢钾(pH2.5),0.8mL/min,25℃,210nm。已经试着调节流动相浓度,pH,以及甲醇添加量,流速和柱温,但它们始终都分不开。急死人了。
3楼2013-07-07 11:28:39
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xx小小xx

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
静唯尘: 金币+3 2013-07-07 14:54:26
不知道你用什么色谱柱,这类亲水性很强的有机酸,调整流动相的余地比较小,应该在色谱柱上改善
C18可能不太容易,用氰基柱应该会有改善,用离子交换色谱会比较适合
如果只有C18柱,可以试一下离子对色谱
4楼2013-07-07 13:17:53
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