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MaoNaiJi

金虫 (正式写手)

你的原话:
之后每隔2分钟测一次,得到的抑制率依次为:39%,35%,34%。在其他抑制剂浓度下也有同样的趋势出现。
抑制率=(A空白组-A抑制剂组)/A空白组

请你自己从公式分析为什么抑制率会下降?可能是你的产物不稳定 吸光值达到一定时间 就下降了
所以我建议你扫描时间曲线  然后所有的样品都在同样的时刻测定
另外我说的是 吸光值未下降的那一段 你没看清楚
测酶活都是测初速度 就是刚开始上升的那段 请复习生化书
11楼2013-07-11 20:38:35
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redyna渊

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

在单测酶活力的时候应该会要除一个时间的,所以我觉得你是不是应该把未抑制的和抑制后的酶活单独算出来再做抑制率,而不是单纯的减去吸光值?
12楼2013-07-12 09:45:46
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拉风蜗牛王

金虫 (正式写手)

引用回帖:
11楼: Originally posted by MaoNaiJi at 2013-07-11 20:38:35
你的原话:
之后每隔2分钟测一次,得到的抑制率依次为:39%,35%,34%。在其他抑制剂浓度下也有同样的趋势出现。
抑制率=(A空白组-A抑制剂组)/A空白组

请你自己从公式分析为什么抑制率会下降?可能是你的产物 ...

我只能说你没做过测定抑制率的实验......................
13楼2013-07-12 09:46:12
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拉风蜗牛王

金虫 (正式写手)

引用回帖:
12楼: Originally posted by redyna渊 at 2013-07-12 09:45:46
在单测酶活力的时候应该会要除一个时间的,所以我觉得你是不是应该把未抑制的和抑制后的酶活单独算出来再做抑制率,而不是单纯的减去吸光值?

我的吸光值是由于生成产物才会产生的,即吸光值与产物的量成正比,产物的量与酶活成正比,所以吸光值与酶活成正比。我认为可以直接用吸光值来计算。
14楼2013-07-12 14:53:14
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redyna渊

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
拉风蜗牛王: 金币+8, ★★★很有帮助 2013-07-13 15:03:18
引用回帖:
14楼: Originally posted by 拉风蜗牛王 at 2013-07-12 14:53:14
我的吸光值是由于生成产物才会产生的,即吸光值与产物的量成正比,产物的量与酶活成正比,所以吸光值与酶活成正比。我认为可以直接用吸光值来计算。...

的确是这样的,但是你生成产物都有个时间速率的问题,带时间的酶活曲线更能说明问题,那种就直接一级拟合比K了。
你可以去看看酶活的定义,都是在某个温度下,多长时间内把底物变成产物的量来表示的。有了时间的意义,你这个抑制率可能才不会有问题,每段时间酶活的变化是不一样的。
15楼2013-07-13 13:07:54
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拉风蜗牛王

金虫 (正式写手)

引用回帖:
15楼: Originally posted by redyna渊 at 2013-07-13 13:07:54
的确是这样的,但是你生成产物都有个时间速率的问题,带时间的酶活曲线更能说明问题,那种就直接一级拟合比K了。
你可以去看看酶活的定义,都是在某个温度下,多长时间内把底物变成产物的量来表示的。有了时间的意 ...

恩有道理,谢谢。
16楼2013-07-13 15:03:12
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chenghaha

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 拉风蜗牛王 at 2013-07-05 13:38:59
谢谢您的帮助!!!!!我的吸光值并没有下降,是计算得到的抑制率下降了,抑制率=(A空白组-A抑制剂组)/A空白组。空白组是指只加酶和底物但是不加抑制剂。

你好,我现在在做乙酰胆碱酯的抑制实验,出现了和你一样的问题,做了分子对接是有抑制的,我的浓度更高反而抑制率下降,而且总是出现负值是什么原因,还有各个浓度测出来的吸光值没很大的梯度,请问你后面怎么解决了
17楼2020-07-10 23:20:06
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