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rtycool

木虫 (小有名气)

[求助] 薄层层析原点的问题

本小菜虫在做薄层层析时有几个问题不明白
1.薄层层析展开后会不会在原点仍然留有一个斑?我做的是色素,每次展开后原点点样的那个斑点仍然还在,这样会有怎样的影响?
2.拖尾的问题,本小菜虫的样品点有时候向前拖尾有时候向后拖尾有时候直接成一条线了。。。为什么会出现这些问题呢?加酸或碱都加试了,没什么变化。
3.问一个跟薄层没关的问题,做HPLC对样品的要求是什么呢?是不是只要能过微滤膜就可以呢?
求大神现身啊
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wanglibo66

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
rtycool: 金币+10, ★★★很有帮助 2013-07-04 16:37:28
rtycool: 金币+5 2013-07-04 16:38:00
1 原点有斑点是正常的,因为硅胶的死吸附,但是肯定会有样品跑上去的,对于定性来说没什么问题。
2 不知道你做的样品极性如何,如果极性很大的话,建议用多项系统展开。
3 做HPLC的样品,只要是在甲醇或乙腈或水里的溶解性好就可以做,当然做之前要过膜。保证进液相的样品是真溶液。
2楼2013-07-04 07:53:36
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tangjiannnu

铁杆木虫 (知名作家)

拖尾的话,加酸,碱如果没效果,建议点样时减小样品浓度,或者在展开剂中加点二氯甲烷
小书童
3楼2013-07-04 10:46:42
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天下无双ts

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
rtycool: 金币+15 2013-07-04 16:38:05
1.薄层层析展开后会不会在原点仍然留有一个斑?我做的是色素,每次展开后原点点样的那个斑点仍然还在,这样会有怎样的影响?
有的色素相对与样品来说 极性比较大 在原点正常,如果要展开就加大极性吧
2.拖尾的问题,本小菜虫的样品点有时候向前拖尾有时候向后拖尾有时候直接成一条线了。。。为什么会出现这些问题呢?加酸或碱都加试了,没什么变化。
样品有酸性或碱性 尝试三相或者四相展开系统,也可以查查文献里是怎么展开的
3.问一个跟薄层没关的问题,做HPLC对样品的要求是什么呢?是不是只要能过微滤膜就可以呢?
一般用甲醇 乙腈 溶解,也可以加点四氢呋喃助溶 但不要太多,过微孔滤膜是必须的
4楼2013-07-04 14:33:27
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rtycool

木虫 (小有名气)

楼上几位给的信息都很有价值,谢谢了。还有3楼不知为什么不能给你金币,没有回帖评分那个按钮,抱歉。。。
5楼2013-07-04 16:40:02
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rtycool

木虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by tangjiannnu at 2013-07-04 10:46:42
拖尾的话,加酸,碱如果没效果,建议点样时减小样品浓度,或者在展开剂中加点二氯甲烷

请问加二氯甲烷的作用是什么?
6楼2013-07-08 20:21:29
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rtycool

木虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by wanglibo66 at 2013-07-04 07:53:36
1 原点有斑点是正常的,因为硅胶的死吸附,但是肯定会有样品跑上去的,对于定性来说没什么问题。
2 不知道你做的样品极性如何,如果极性很大的话,建议用多项系统展开。
3 做HPLC的样品,只要是在甲醇或乙腈或水里 ...

多项展开系统是指由多种溶剂组成的展开剂吗?它有什么优点?
7楼2013-07-08 20:23:33
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tangjiannnu

铁杆木虫 (知名作家)

引用回帖:
6楼: Originally posted by rtycool at 2013-07-08 20:21:29
请问加二氯甲烷的作用是什么?...

也是调节极性的,而且可以增加物质的溶解性
小书童
8楼2013-07-08 20:39:14
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