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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 天然药物化学 » 抗氧化活性成分的分离纯化
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Eva_yanglh

金虫 (小有名气)

[交流] 抗氧化活性成分的分离纯化 已有5人参与

目前在做植化，粗提物萃取后欲把水部进一步分析，由于含水量大不能上硅胶于是我用了大孔树脂，然后得到50%乙醇洗脱部位含有较多我想要的物质，经过UV确定波长后再用HPLC扫描发现只有四个峰，物质可不可以判断相对较纯了呢？可是截取某峰进行打谱还是不OK··不知道下一步该怎么再纯化了。50%乙醇部能上硅胶不？可是看资料硅胶还是属于粗分的分离手段呢···用凝胶么？希望有经验的大侠们能指导交流下.
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做这个分离纯化，想死的心都有了···
1楼 2013-07-03 11:59:42
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分离高手

新虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
xiaoxiao270: 金币+2 2013-07-06 19:09:48
引用回帖:
5楼: Originally posted by Eva_yanglh at 2013-07-04 15:15:17
SKP-10-4300这树脂好像挺少人用的吧，我搜索了下没有相关的中文或英文文献参考呢，你有不？可以发给我吗？eva_yanglh@126.com  关于ODS填料，目前了解也是比较少的，刚查了下，除了粒径的区别，还有其他类别吧，比 ...

SKP-10-4300用的人应该挺多的，这种一般药厂里这两年用的多，查文献不行，你查下专利。我用他开发过一个工艺，一个分子量很大的抗生素，结构类似物特别的多，质量标准也严格，开始我们参考了好多国外的专利，最后还用过20L的制备液相，反正想了好多办法，成本都很高，最后选用的这个填料，产品已经上生产了。你直接给他们厂家要点样品，你做实验能用多少啊，估计直接免费给你了，拿来3天实验结果不久出来了，还用在这花这么多时间看这么多无用瞎编的文献，至于你说的文献呢，以我的经验  国内的就不要看了，你觉着可信性有多高，国外的还行。
至于ODS确实分很多种，粒径  孔径  键合度  封端不封  ，其实你也不用纠结于这些，估计你的东西如果不难分，粒径50u的球形硅胶键合的就能分开你的东西。
凝胶以我的经验要分出单体的话，不是那么的容易，因为他只是一个分子塞  反向溶剂中还有点反向的作用。硅胶你也可以试试，但是有一点吸附会比较严重的。  并且不容易成功分出单体，再就是你是MM吧  硅胶所用的正向溶剂你是真的一点不怕啊。
至于你说的那分析当制备分产品的话，我感觉都要，最少50mg打个谱，你把分析柱累。
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12楼2013-07-05 09:59:40
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wangkaibo123

荣誉版主 (职业作家)

kerry

优秀版主
★ ★
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xiaoxiao270: 金币+1 2013-07-06 19:09:18
先把样品旋干，之后就可以上硅胶柱了，液相制备最好了

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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Domyallbesttohaveahappylife.
2楼2013-07-03 13:32:15
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分离高手

新虫 (小有名气)
★ ★ ★
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xiaoxiao270: 金币+2 2013-07-06 19:09:22
你这个好弄
方案一：直接把接出来的50%乙醇收集液，加上一倍的水稀释到25%直接上样，上反向层析树脂SKP-10-4300,然后25%乙醇   35%乙醇   45%乙醇  55%乙醇梯度洗脱 ，分段收集你要的每一个物质就行了。然后浓缩旋干掉就OK。
方法二：自己装个ODS柱，粒径最好小点的，40um左右的，浓缩干了，少量溶液上样，梯度洗脱收集。
方案三：有制备液相的话，直接上制备液相。
至于硅胶  凝胶 就基本拉到了。极性太大，又是同一部位
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3楼2013-07-04 12:50:59
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Eva_yanglh

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wangkaibo123 at 2013-07-03 13:32:15
先把样品旋干，之后就可以上硅胶柱了，液相制备最好了

旋干之后用什么溶剂溶解呢？我们这台旋转蒸发仪老旋不干，好苦恼···
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做这个分离纯化，想死的心都有了···
4楼2013-07-04 15:01:53
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