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欠踹的背影

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
10楼: Originally posted by 没入尘埃5 at 2013-07-03 09:37:50
RNA电泳的时候上样500ng就够了,胶用1%的,marker用2000的,很容易看出来有没有基因组污染,有的话,应该在2000上面有一个条带,是基因组DNA,你这个上面那个最亮的应该是基因组DNA,下面的两条带位置也不对,你再重 ...

你好,那我还想问问基因组DNA污染一般由什么原因造成的啊?我还是按照原来的方式的提的,怎么会出现这种情况,有点不解
11楼2013-07-03 09:40:45
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zhouking8758

木虫 (正式写手)


kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-07-04 11:40:22
如果有DNA污染,可以加DNA酶来消化去除。
提取RNA过程要防止RNase的污染,去上清的时候宁可损失一点,也不要吸取到蛋白质等。
12楼2013-07-03 09:56:42
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没入尘埃5

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助! 2013-07-06 02:00:42
引用回帖:
11楼: Originally posted by 欠踹的背影 at 2013-07-03 09:40:45
你好,那我还想问问基因组DNA污染一般由什么原因造成的啊?我还是按照原来的方式的提的,怎么会出现这种情况,有点不解...

就是在组织中提取RNA的时候带出来的DNA,这是很常见的,用DNA酶处理,除掉基因组DNA的污染
如果不努力,肯定没收获!
13楼2013-07-03 14:37:44
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欠踹的背影

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
13楼: Originally posted by 没入尘埃5 at 2013-07-03 14:37:44
就是在组织中提取RNA的时候带出来的DNA,这是很常见的,用DNA酶处理,除掉基因组DNA的污染...

谢谢,可是我用的是OMEGA公司的提RNA试剂盒,出现这种问题的可能性不大吧
14楼2013-07-03 19:46:43
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武穆大成

木虫 (著名写手)

笨蛋

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感谢参与,应助指数 +1
DNA残留多,rna降解。。建议抽提时要小心吸取上清
15楼2013-07-03 20:02:53
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grape_vine

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
亮的带是DNA
如果你点了3ul 那么你的RNA量应该是小于100ng/ul的 量比较低了
16楼2013-07-03 23:21:32
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grape_vine

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
11楼: Originally posted by 欠踹的背影 at 2013-07-03 09:40:45
你好,那我还想问问基因组DNA污染一般由什么原因造成的啊?我还是按照原来的方式的提的,怎么会出现这种情况,有点不解...

我怀疑你是不是这次的原始材料量太大了
17楼2013-07-03 23:22:27
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没入尘埃5

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2013-07-04 13:39:58
引用回帖:
14楼: Originally posted by 欠踹的背影 at 2013-07-03 19:46:43
谢谢,可是我用的是OMEGA公司的提RNA试剂盒,出现这种问题的可能性不大吧...

试剂盒也很可能有DNA污染的,我们同学也有用试剂盒提的,但是他们每次提完就再用DNA酶处理
如果不努力,肯定没收获!
18楼2013-07-04 08:29:45
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幽魂银龙

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
重新提吧,都降解了
19楼2013-07-04 10:32:25
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青荷初想

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 电泳检测RNA,单纯看提取效果时,不用DEPC水配的缓冲液哦! 2013-07-06 02:02:08
你电泳的缓冲液是用DEPC水配的吗,而且一般要放在4℃冰箱电泳,电泳时间没必要那么长,提取的时候室温要控制,你是边研磨边加液氮吗?组织要求一直是处于冰冻状态,不能融化。
20楼2013-07-04 14:06:37
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