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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR扩增
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崔永霞

铁虫 (小有名气)

[求助] PCR扩增

各位前辈，我这几天在做PCR，可是怎么也扩不出来了，前几天我还可以扩出来，而且扩了好几次重复性也很好，条带也很清晰，可是这周在相同的条件下我就再也扩不出来了，请大家帮我分析分析这是什么原因。
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每个人都有心底最柔软的地方，请不要触碰它，因为每个人都有自己的尊严！
1楼 2013-06-29 21:12:27
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

chjinzhi

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
崔永霞: 金币+1, ★有帮助, 谢谢 2013-06-29 21:38:21
你换模版了没有？会不会是你模板的问题？
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3楼2013-06-29 21:25:47
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rlrwdsk

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
崔永霞: 金币+1, ★有帮助 2013-06-30 16:50:31
我也这样，同样的东西，放了几天就再也做不出来的。。。休息一下。。。没准就时来运转了
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7楼2013-06-30 14:33:31
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普通回帖

果果佳佳

木虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
崔永霞(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香。分子生物版块 期待你的精彩和更详细的解答。 2013-06-29 21:32:08
这个原因可能有很多，比如确定加入了正确的引物，调好循环扩增的次数，温度，聚合酶什么的都可能影响。你看一下哪个实验过程出现了问题吧！
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2楼2013-06-29 21:21:15
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崔永霞

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by chjinzhi at 2013-06-29 21:25:47
你换模版了没有？会不会是你模板的问题？

换过了，我用的模板是50ng的，如果我用琼脂糖凝胶检测的话是否可以检测到，是否在紫外下可以看到条带？
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每个人都有心底最柔软的地方，请不要触碰它，因为每个人都有自己的尊严！
4楼2013-06-29 21:38:01
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崔永霞

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 果果佳佳 at 2013-06-29 21:21:15
这个原因可能有很多，比如确定加入了正确的引物，调好循环扩增的次数，温度，聚合酶什么的都可能影响。你看一下哪个实验过程出现了问题吧！

我用的是Mix，可是我的扩增条件和前几次的是完全一样的啊，用的试剂都是一样的，前几次扩增都很好可是歇了一周就再也扩不出来了，郁闷的，也找不出原因来。求前辈指点！
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每个人都有心底最柔软的地方，请不要触碰它，因为每个人都有自己的尊严！
5楼2013-06-29 21:41:34
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光树林

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
崔永霞: 金币+1, ★有帮助 2013-06-30 16:51:09
休息一天吧，我有时候就是这样子
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一路向北
6楼2013-06-30 01:40:43
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小乖_1990

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
崔永霞: 金币+1, ★有帮助, 非常感谢！ 2013-06-30 16:50:03
我感觉要么是你的mix被污染了，里面的酶失效了；要么就是机器坏了。
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走自己的路，让别人羡慕嫉妒恨去吧！！！
8楼2013-06-30 15:33:23
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崔永霞

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 小乖_1990 at 2013-06-30 15:33:23
我感觉要么是你的mix被污染了，里面的酶失效了；要么就是机器坏了。

机子我也换过啊，MIX用的是没开过封的，难道试剂买回来就坏了？
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每个人都有心底最柔软的地方，请不要触碰它，因为每个人都有自己的尊严！
9楼2013-06-30 16:49:41
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水晶蛋蛋

铜虫 (小有名气)
我最近也是这个问题
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10楼2013-07-02 10:58:46
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