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崔永霞

铁虫 (小有名气)

[求助] PCR扩增

各位前辈,我这几天在做PCR,可是怎么也扩不出来了,前几天我还可以扩出来,而且扩了好几次重复性也很好,条带也很清晰,可是这周在相同的条件下我就再也扩不出来了,请大家帮我分析分析这是什么原因。
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每个人都有心底最柔软的地方,请不要触碰它,因为每个人都有自己的尊严!
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chjinzhi

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
崔永霞: 金币+1, 有帮助, 谢谢 2013-06-29 21:38:21
你换模版了没有?会不会是你模板的问题?
3楼2013-06-29 21:25:47
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rlrwdsk

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
崔永霞: 金币+1, 有帮助 2013-06-30 16:50:31
我也这样,同样的东西,放了几天就再也做不出来的。。。休息一下。。。没准就时来运转了
7楼2013-06-30 14:33:31
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普通回帖

果果佳佳

木虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
崔永霞(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香。分子生物版块 期待你的精彩和更详细的解答。 2013-06-29 21:32:08
这个原因可能有很多,比如确定加入了正确的引物,调好循环扩增的次数,温度,聚合酶什么的都可能影响。你看一下哪个实验过程出现了问题吧!
2楼2013-06-29 21:21:15
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崔永霞

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by chjinzhi at 2013-06-29 21:25:47
你换模版了没有?会不会是你模板的问题?

换过了,我用的模板是50ng的,如果我用琼脂糖凝胶检测的话是否可以检测到,是否在紫外下可以看到条带?
每个人都有心底最柔软的地方,请不要触碰它,因为每个人都有自己的尊严!
4楼2013-06-29 21:38:01
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崔永霞

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 果果佳佳 at 2013-06-29 21:21:15
这个原因可能有很多,比如确定加入了正确的引物,调好循环扩增的次数,温度,聚合酶什么的都可能影响。你看一下哪个实验过程出现了问题吧!

我用的是Mix,可是我的扩增条件和前几次的是完全一样的啊,用的试剂都是一样的,前几次扩增都很好可是歇了一周就再也扩不出来了,郁闷的,也找不出原因来。求前辈指点!
每个人都有心底最柔软的地方,请不要触碰它,因为每个人都有自己的尊严!
5楼2013-06-29 21:41:34
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光树林

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
崔永霞: 金币+1, 有帮助 2013-06-30 16:51:09
休息一天吧,我有时候就是这样子
一路向北
6楼2013-06-30 01:40:43
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小乖_1990

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
崔永霞: 金币+1, 有帮助, 非常感谢! 2013-06-30 16:50:03
我感觉要么是你的mix被污染了,里面的酶失效了;要么就是机器坏了。
走自己的路,让别人羡慕嫉妒恨去吧!!!
8楼2013-06-30 15:33:23
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崔永霞

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 小乖_1990 at 2013-06-30 15:33:23
我感觉要么是你的mix被污染了,里面的酶失效了;要么就是机器坏了。

机子我也换过啊,MIX用的是没开过封的,难道试剂买回来就坏了?
每个人都有心底最柔软的地方,请不要触碰它,因为每个人都有自己的尊严!
9楼2013-06-30 16:49:41
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水晶蛋蛋

铜虫 (小有名气)

我最近也是这个问题
10楼2013-07-02 10:58:46
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