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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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maliyuan0924

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[交流] 磷酸钙转染的注意事项

磷酸钙转染时,把DNA-氯化钙溶液加入到BBS溶液中,不要把BBS溶液加入到DNA-氯化钙溶液中。这是为什么呢?
说明书上写的
注意事项:  ¾ 转染时,把DNA-氯化钙溶液加入到BBS溶液中,不要把BBS溶液加入到DNA-氯化钙溶液中。  ¾ 高纯度的质粒是获得高转染效率的必要条件,要确保A260/A280大于1.8,并且电泳检测抽提到的质粒90%以上都是超螺旋。  ¾ 在用磷酸钙法转染细胞时应使用浓度不高于5%的二氧化碳,二氧化碳的最佳浓度为3%左右。  ¾ BBS溶液的pH值直接关系到转染效率,尽量避免把BBS溶液长时间暴露在空气中,以免被空气中的二氧化碳酸化。 ¾ 转染时由于质粒不同、细胞不同,最佳的质粒用量需自行摸索。 ¾  为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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