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杨梅1118

新虫 (初入文坛)

[求助] 求问各位大侠：用离子交换柱分离一个蛋白的不同多肽，蛋白过柱子前必须要烷基化吗？

如图所示，是文献上蛋白的SDS-PAGE电泳图，1是将还原了的，2是将蛋白还原并烷基化了的，3是未还原的电泳条带。
       我想把还原电泳图中的两个组分用离子交换柱分开，看了一篇文献（也是唯一一篇做过这个分离的文献）上写，过柱子前将蛋白还原并烷基化了然后顺利分开，但是我觉得理论上只要将蛋白还原，图中两个组分就能分开，不烷基化应该也可以分开。
       求问各位大侠，如果不烷基化只还原到底能不能顺利分开这两种组分？可以的话上柱子前一般怎样还原蛋白，是不是只加入DTT就可以？
        PS:小弟刚开始接触蛋白分离纯化，为了发个好点的文章。。。金币也不多，还望各位大侠不吝赐教。。。跪谢！！！
求问各位大侠：用离子交换柱分离一个蛋白的不同多肽，蛋白过柱子前必须要烷基化吗？
SDS-PAGE电泳图.jpg
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1楼 2013-06-26 17:59:41
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xdz1978

至尊木虫 (文坛精英)

持之以恒！

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
只还原也可以的，可以分离
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一身正气，两袖清风，三餐温饱，四大皆空！
2楼2013-06-26 20:29:03
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杨梅1118

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by xdz1978 at 2013-06-26 20:29:03
只还原也可以的，可以分离

哦。。。那想再请教您一下，如果只还原的话，上柱子之前一般怎样处理？文献上是烷基化后上柱的，所以只写了烷基化的处理方法，没写还原的处理方法。。。文献原文请见下图，万谢大侠！！！
求问各位大侠：用离子交换柱分离一个蛋白的不同多肽，蛋白过柱子前必须要烷基化吗？-1
烷基化1.jpg


求问各位大侠：用离子交换柱分离一个蛋白的不同多肽，蛋白过柱子前必须要烷基化吗？-2
烷基化2.jpg
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3楼2013-06-27 19:22:17
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