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杨梅1118

新虫 (初入文坛)

[求助] 求问各位大侠:用离子交换柱分离一个蛋白的不同多肽,蛋白过柱子前必须要烷基化吗?

如图所示,是文献上蛋白的SDS-PAGE电泳图,1是将还原了的,2是将蛋白还原并烷基化了的,3是未还原的电泳条带。
       我想把还原电泳图中的两个组分用离子交换柱分开,看了一篇文献(也是唯一一篇做过这个分离的文献)上写,过柱子前将蛋白还原并烷基化了然后顺利分开,但是我觉得理论上只要将蛋白还原,图中两个组分就能分开,不烷基化应该也可以分开。
       求问各位大侠,如果不烷基化只还原到底能不能顺利分开这两种组分?可以的话上柱子前一般怎样还原蛋白,是不是只加入DTT就可以?
        PS:小弟刚开始接触蛋白分离纯化,为了发个好点的文章。。。金币也不多,还望各位大侠不吝赐教。。。跪谢!!!
求问各位大侠:用离子交换柱分离一个蛋白的不同多肽,蛋白过柱子前必须要烷基化吗?
SDS-PAGE电泳图.jpg
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xdz1978

至尊木虫 (文坛精英)

持之以恒!

【答案】应助回帖

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只还原也可以的,可以分离
一身正气,两袖清风,三餐温饱,四大皆空!
2楼2013-06-26 20:29:03
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杨梅1118

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by xdz1978 at 2013-06-26 20:29:03
只还原也可以的,可以分离

哦。。。那想再请教您一下,如果只还原的话,上柱子之前一般怎样处理?文献上是烷基化后上柱的,所以只写了烷基化的处理方法,没写还原的处理方法。。。文献原文请见下图,万谢大侠!!!
求问各位大侠:用离子交换柱分离一个蛋白的不同多肽,蛋白过柱子前必须要烷基化吗?-1
烷基化1.jpg


求问各位大侠:用离子交换柱分离一个蛋白的不同多肽,蛋白过柱子前必须要烷基化吗?-2
烷基化2.jpg

3楼2013-06-27 19:22:17
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